Ir al contenido
Células NCI-H209
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Carcinoma de células pequeñas
Lugar de metástasis
Médula ósea
Sinónimos
H209, H-209, NCIH209

Documentos

Células NCI-H209

Cell line · Número de producto 300183

La línea celular NCI-H209 fue obtenida por A. F. Gazdar y sus colaboradores en 1979 a partir de la médula ósea de un paciente con cáncer de pulmón de células pequeñas. La médula ósea...

€430.00sin impuestos ni gastos de envío

Personalización / Recomendaciones

Hecho por encargo
1

01Información general

Descripción
La línea celular NCI-H209 fue derivada por A.F. Gazdar y asociados en 1979 de la médula ósea de un paciente con cáncer de pulmón de células pequeñas. La muestra de médula ósea se tomó antes del tratamiento. Se trata de una línea celular clásica de SCLC que expresa niveles elevados de cuatro marcadores bioquímicos (enolasa neuronal específica, isoenzima cerebral de la creatina quinasa, L-DOPA descarboxilasa e inmunoreactividad similar a la bombesina. Las secuencias de ADN C-myc no están amplificadas. No se han detectado anomalías estructurales graves en el ADN. Se trata de una línea celular que crece en forma de grandes agregados en suspensión. Sólo los agregados son viables, pero no se puede medir un porcentaje de viabilidad significativo. El medio normalmente contiene grandes cantidades de restos celulares. Las células expresan una forma aberrante de RB1 que no está fosforilada, aparentemente debido a una mutación puntual única en el codón 706 (Cys-> Phe).
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Carcinoma de células pequeñas
Lugar de metástasis
Médula ósea
Sinónimos
  • H209
  • H-209
  • NCIH209

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, forma tumores transplantables con histología típica de CPCP en ratones desnudos

04Identificadores

Referencia
NCI-H209 (número de catálogo de Cytion 300183)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1525

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
P53 negativo
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Frecuencia del fenotipo Producto = 0,0624
Productos
La línea produce cantidades normales de ARNm de p53 en relación con el pulmón normal.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 105 células/ml
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
55 años
Origen étnico
Caucásico