Přejít na obsah
Buňky NCI-H209
Tkáň
Plíce
Nemoc
Malobuněčný karcinom
Místo metastázy
Kostní dřeň
Synonyma
H209, H-209, NCIH209

Dokumenty

Buňky NCI-H209

Cell line · Číslo výrobku 300183

Buněčná linie NCI-H209 byla izolována A. F. Gazdarem a jeho spolupracovníky v roce 1979 z kostní dřeně pacienta s malobuněčným karcinomem plic. Kostní dřeň...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis
Buněčná linie NCI-H209 byla odvozena A. F. Gazdarem a jeho spolupracovníky v roce 1979 z kostní dřeně pacienta s malobuněčným karcinomem plic. Vzorek kostní dřeně byl odebrán před léčbou. Tato linie je klasickou buněčnou linií SCLC, která exprimuje zvýšené hladiny čtyř biochemických markerů (neuron specifická enoláza, mozkový izoenzym kreatinkinázy, L-DOPA dekarboxyláza a imunoreaktivita podobná bombesinu. Sekvence DNA C-myc nejsou amplifikovány. Nebyly zjištěny žádné hrubé strukturální abnormality DNA. Jedná se o buněčnou linii, která roste jako velké agregáty v suspenzi. Pouze agregáty jsou životaschopné, ale nelze změřit žádné významné procento životaschopnosti. Médium obvykle obsahuje velké množství buněčných zbytků. Buňky exprimují aberantní formu RB1, která není fosforylovaná, zřejmě v důsledku jediné bodové mutace v kodonu 706 (Cys-> Phe).
Tkáň
Plíce
Nemoc
Malobuněčný karcinom
Místo metastázy
Kostní dřeň
Synonyma
  • H209
  • H-209
  • NCIH209

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, vytváří transplantovatelné nádory s typickou histologií SCLC u nahých myší

04Identifikátory

Citace
NCI-H209 (katalogové číslo Cytion 300183)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1525

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53 negativní
Isoenzymy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, součin četnosti fenotypů = 0,0624
Produkty
Linie produkuje normální množství mRNA p53 ve srovnání s normálními plícemi.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 105 buněk/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
55 let
Etnická příslušnost
Kavkazský