Preskoči na vsebino
Celice NCI-H209
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Drobnocelični karcinom
Mesto metastaze
Kostni mozeg
Sinonimi
H209, H-209, NCIH209

Dokumenti

Celice NCI-H209

Cell line · Številka izdelka 300183

Celično linijo NCI-H209 so leta 1979 A. F. Gazdar in sodelavci pridobili iz kostnega mozga bolnika z drobnoceličnim pljučnim rakom. Kostni mozeg...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Po naročilu
1

01Splošne informacije

Opis
Celično linijo NCI-H209 so leta 1979 A. F. Gazdar in sodelavci pridobili iz kostnega mozga bolnika z drobnoceličnim rakom pljuč. Vzorec kostnega mozga je bil odvzet pred zdravljenjem. Gre za klasično celično linijo SCLC, ki izraža povišane vrednosti štirih biokemičnih označevalcev (nevronsko specifična enolaza, možganski izoencim kreatin kinaze, dekarboksilaza L-DOPA in bombesinu podobna imunoreaktivnost. C-myc DNK zaporedja se ne pomnožijo. Grobe strukturne nepravilnosti DNK niso bile ugotovljene. To je celična linija, ki raste kot veliki agregati v suspenziji. Življenjski so le agregati, vendar ni mogoče izmeriti pomembnega odstotka vitalnosti. Medij običajno vsebuje velike količine celičnih ostankov. Celice izražajo aberantno obliko RB1, ki ni fosforilirana, kar je očitno posledica ene točkovne mutacije na kodonu 706 (Cys->Phe).
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Drobnocelični karcinom
Mesto metastaze
Kostni mozeg
Sinonimi
  • H209
  • H-209
  • NCIH209

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, tvori presadljive tumorje s tipično histologijo SCLC pri golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
NCI-H209 (kataloška številka Cytion 300183)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1525

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
P53 negativen
Izoenzimi
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, produkt fenotipske frekvence = 0,0624
Izdelki
Linija proizvaja normalno količino mRNA p53 glede na normalna pljuča.

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 105 celic/ml
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
55 let
Etnična pripadnost
Kavkaški