Gå direkt till innehållet
NCI-H209-celler
Vävnad
Lungan
Sjukdom
Småcellig karcinom
Metastaseringsställe
Benmärg
Synonymer
H209, H-209, NCIH209

NCI-H209-celler

Cell line · Produktnummer 300183

Cellinjen NCI-H209 framställdes av A.F. Gazdar och medarbetare år 1979 från benmärgen hos en patient med småcellig lungcancer. Benmärgen...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Tillverkas på beställning
1

01Allmän information

Beskrivning
Cellinjen NCI-H209 togs fram av A.F. Gazdar och medarbetare 1979 från benmärgen hos en patient med småcellig lungcancer. Benmärgsprovet togs före behandlingen. Linjen är en klassisk SCLC-cellinje som uttrycker förhöjda nivåer av fyra biokemiska markörer (neuronspecifikt enolas, hjärnisoenzym av kreatinkinas, L-DOPA-dekarboxylas och bombesinliknande immunreaktivitet. C-myc DNA-sekvenser är inte amplifierade. Inga grova strukturella DNA-abnormaliteter upptäcktes. Detta är en cellinje som växer som stora aggregat i suspension. Endast aggregaten är livsdugliga, men någon meningsfull procentuell viabilitet kan inte mätas. Mediet kommer normalt att innehålla stora mängder celldebris. Cellerna uttrycker en avvikande form av RB1 som inte är fosforylerad, uppenbarligen på grund av en enpunktsmutation vid kodon 706 (Cys-> Phe).
Vävnad
Lungan
Sjukdom
Småcellig karcinom
Metastaseringsställe
Benmärg
Synonymer
  • H209
  • H-209
  • NCIH209

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Upphängning
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
Ja, bildar transplanterbara tumörer med typisk SCLC-histologi i nakenmöss

04Identifierare

Källa
NCI-H209 (Cytion katalognummer 300183)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1525

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
P53-negativ
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, fenotypfrekvens produkt = 0,0624
Produkter
Linjen producerar normala mängder av p53-mRNA i förhållande till normal lunga.

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 105 celler/ml
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
55 år
Etnicitet
Kaukasisk