الانتقال إلى المحتوى
خلايا NCI-H209
الأنسجة
الرئة
المرض
سرطان الخلايا الصغيرة
موقع الانتشار
النخاع العظمي
المرادفات
H209, H-209, NCIH209

المستندات

خلايا NCI-H209

Cell line · رقم المنتج 300183

تم عزل السلالة الخلوية NCI-H209 على يد أ. ف. غازدار وزملاؤه في عام 1979 من نخاع العظم لمريض مصاب بسرطان الرئة ذي الخلايا الصغيرة. نخاع العظم...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

حسب الطلب
1

01معلومات عامة

الوصف
تم اشتقاق خط الخلايا NCI-H209 من قبل أ. ف. غازدار وزملائه في عام 1979 من نخاع عظم مريض مصاب بسرطان الخلايا الصغيرة في الرئة. تم أخذ عينة نخاع العظم قبل العلاج. هذا الخط هو خط خلايا كلاسيكي من الخلايا السرطانية ذات الخلايا الصغيرة في الرئة والذي يعبر عن مستويات مرتفعة من أربع علامات كيميائية حيوية (إنولاز الخلايا العصبية المحدد، وإيزونزيم الدماغ من الكرياتين كيناز، و L-DOPA ديكاربوكسيلاز و تفاعل مناعي شبيه بالبومبيسين. لم يتم تضخيم تسلسل الحمض النووي C-myc. لم يتم اكتشاف أي تشوهات هيكلية جسيمة في الحمض النووي. هذا هو خط خلوي ينمو على شكل مجاميع كبيرة في المعلق. المجاميع فقط هي القابلة للحياة، ولكن لا يمكن قياس نسبة حيوية ذات مغزى. يحتوي الوسط عادةً على كميات كبيرة من حطام الخلايا. وتعبر الخلايا عن شكل شاذ من RB1 غير مفسفر، على ما يبدو بسبب طفرة نقطة واحدة عند الكودون 706 (Cys-> Phe).
الأنسجة
الرئة
المرض
سرطان الخلايا الصغيرة
موقع الانتشار
النخاع العظمي
المرادفات
  • H209
  • H-209
  • NCIH209

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، تشكل أوراماً قابلة للزرع مع أنسجة نموذجية للورم السرطاني الحلقي الشوكي في الفئران العارية

04المعرّفات

المرجع
NCI-H209 (كتالوج سيتيون رقم 300183)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1525

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
P53 سالب
الإيزوزيمات
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, 1, GLO-1, 1-2، منتج تكرار النمط الظاهري = 0.0624
المنتجات
يُنتج الخط كميات طبيعية من الحمض النووي الريبي المرسال p53 بالنسبة للرئة الطبيعية.

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 105 خلية/مل
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
55 سنة
الأصل العرقي
قوقازي

قد تحتاج أيضًا إلى