Премини към съдържанието
CERV-215
Тъкан
Цервикс
Заболяване
Карцином
Синоними
Cerv-215, MRI-H-215, MRI-H215

Документи

CERV-215

Cell line · Номер на продукта 300292

The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия CERV-215, създадена от д-р Бодген в Изследователския институт "Мейсън", произхожда от първична ксенотрансплантация, наречена MRI-H215, която е адаптирана за трансплантация in vivo.

Тази клетъчна линия представлява агресивна форма на епидермоиден карцином, категоризиран като инвазивен, едроклетъчен, некератинизиращ и слабо диференциран.

Клетъчната линия Cerv-215 е основен ресурс за изследвания на рака, особено при изучаването на генетичните промени и тяхната роля в карциногенезата на шийката на матката. Тази клетъчна линия се характеризира с уникални генетични модификации в гена Smad4, при които специфични екзони са заменени с последователности от други геномни области, което води до експресия на съкратени и вероятно нефункционални протеини Smad4. Тези изменения дават представа за онкогенните свойства на клетъчната линия и за молекулярните механизми, които са в основата на рака на маточната шийка.

Забележително е, че MRI-215 е HPV45 позитивна, но промените в гена Smad4 са независими от интегрирането на HPV, което предполага сложно взаимодействие на генетични фактори, допринасящи за развитието на рака извън вирусните влияния. Тази клетъчна линия служи като безценен инструмент за изследователи, фокусирани върху генетичните аспекти на рака, ролята на Smad4 в туморната прогресия и взаимодействието между човешкия папиломен вирус и клетъчните механизми на гостоприемника.

MRI-H215 предлага уникална платформа за изследване на тънкостите на рака на маточната шийка на молекулярно ниво, което я прави съществен компонент на лабораториите за изследване на рака, целящи да открият нови терапевтични цели и да разберат генетичната основа на туморогенезата.

Тъкан
Цервикс
Заболяване
Карцином
Синоними
  • Cerv-215
  • MRI-H-215
  • MRI-H215

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епидермоиден
Туморогенен
Да, при голи мишки

04Идентификатори

Източник
CERV-215 (каталожен номер 300292 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_5722

05Проява и предразположеност

Вируси
HPV-16 отрицателен
Продукти
Цитокератин 8, 18, виментин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
Препоръчва се 1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
39 години
Етническа принадлежност
Африкански