Gå direkte til indholdet
CERV-215
Væv
Livmoderhalsen
Sygdom
Karcinom
Synonymer
Cerv-215, MRI-H-215, MRI-H215

Dokumenter

CERV-215

Cell line · Varenummer 300292

The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

CERV-215-cellelinjen, som blev etableret af Dr. Bodgen på Mason Research Institute, stammer fra en primær xenotransplantation kaldet MRI-H215, som er blevet tilpasset til in vivo-transplantation.

Denne cellelinje repræsenterer en aggressiv form for epidermoid karcinom, der er kategoriseret som invasiv, storcellet, ikke-keratiniserende og dårligt differentieret.

Cerv-215-cellelinjen er en central ressource for kræftforskning, især i studiet af genetiske ændringer og deres rolle i cervikal karcinogenese. Denne cellelinje er kendetegnet ved unikke genetiske modifikationer i Smad4-genet, hvor specifikke exoner er erstattet af sekvenser fra andre genomiske regioner, hvilket fører til udtryk af afkortede og sandsynligvis ikke-funktionelle Smad4-proteiner. Disse ændringer giver indsigt i cellelinjens onkogene egenskaber og de molekylære mekanismer, der ligger til grund for livmoderhalskræft.

Især er MRI-215 HPV45-positiv, men dens Smad4-genforandringer er uafhængige af HPV-integration, hvilket tyder på et komplekst samspil mellem genetiske faktorer, der bidrager til kræftudvikling ud over virale påvirkninger. Denne cellelinje er et uvurderligt værktøj for forskere, der fokuserer på de genetiske aspekter af kræft, Smad4's rolle i tumorprogression og samspillet mellem human papillomavirus og værtens cellulære mekanismer.

MRI-H215 tilbyder en unik platform til at udforske livmoderhalskræfts forviklinger på molekylært niveau, hvilket gør den til en vigtig komponent i kræftforskningslaboratorier, der har til formål at afdække nye terapeutiske mål og forstå det genetiske grundlag for tumorigenese.

Væv
Livmoderhalsen
Sygdom
Karcinom
Synonymer
  • Cerv-215
  • MRI-H-215
  • MRI-H215

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epidermoid
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CERV-215 (Cytion katalognummer 300292)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_5722

05Udtryk og modtagelighed

Vira
HPV-16 negativ
Produkter
Cytokeratin 8, 18, Vimentin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 anbefales
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
39 år
Etnisk tilhørsforhold
Afrikansk