CERV-215
Cell line · Codice prodotto 300292
The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...
Personalizzazione / Suggerimenti
- CERV-215Cell line€800.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
La linea cellulare CERV-215, creata dal Dr. Bodgen presso il Mason Research Institute, proviene da uno xenotrapianto primario denominato MRI-H215, che è stato adattato per il trapianto in vivo.
Questa linea cellulare rappresenta una forma aggressiva di carcinoma epidermoide, classificato come invasivo, a grandi cellule, non cheratinizzante e scarsamente differenziato.
La linea cellulare Cerv-215 è una risorsa fondamentale per la ricerca sul cancro, in particolare per lo studio delle alterazioni genetiche e del loro ruolo nella carcinogenesi cervicale. Questa linea cellulare è caratterizzata da modifiche genetiche uniche nel gene Smad4, in cui specifici esoni sono sostituiti da sequenze provenienti da altre regioni genomiche, portando all'espressione di proteine Smad4 tronche e probabilmente non funzionali. Queste alterazioni forniscono indicazioni sulle proprietà oncogeniche della linea cellulare e sui meccanismi molecolari alla base del cancro cervicale.
In particolare, la MRI-215 è positiva all'HPV45, ma le sue alterazioni del gene Smad4 sono indipendenti dall'integrazione dell'HPV, suggerendo una complessa interazione di fattori genetici che contribuiscono allo sviluppo del cancro al di là delle influenze virali. Questa linea cellulare è uno strumento prezioso per i ricercatori che si concentrano sugli aspetti genetici del cancro, sul ruolo di Smad4 nella progressione tumorale e sull'interazione tra papillomavirus umano e meccanismi cellulari dell'ospite.
MRI-H215 offre una piattaforma unica per esplorare le complessità del cancro cervicale a livello molecolare, rendendola una componente essenziale dei laboratori di ricerca sul cancro che mirano a scoprire nuovi bersagli terapeutici e a comprendere le basi genetiche della tumorigenesi.
- Tessuto
- Cervice
- Malattia
- Carcinoma
- Sinonimi
- Cerv-215
- MRI-H-215
- MRI-H215
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Donna
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 2
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Tipo di cellula
- Epidermoide
- Tumorigenico
- Sì, in topi nudi
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- CERV-215 (numero di catalogo Cytion 300292)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_5722
05Espressione e suscettibilità
- Virus
- HPV-16 negativo
- Prodotti
- Citocheratina 8, 18, vimentina
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Densità di semina
- Si consiglia 1 x 104 cellule/cm2
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Recupero post-scongelamento
- Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Età dei donatori
- 39 anni
- Etnia
- Africano
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì
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