Pāriet uz saturu
CERV-215
Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Karcinoma
Sinonīmi
Cerv-215, MRI-H-215, MRI-H215

Dokumenti

CERV-215

Cell line · Preces numurs 300292

The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CERV-215 šūnu līnija, ko izveidoja Dr. Bodgens Mason Research Institute, ir iegūta no primārā ksenotransplantāta MRI-H215, kas ir pielāgots transplantācijai in vivo.

Šī šūnu līnija pārstāv agresīvu epidermoīdās karcinomas formu, kas tiek klasificēta kā invazīva, lielšūnu, nekeratinizējoša un vāji diferencēta.

Cerv-215 šūnu līnija ir galvenais resurss vēža pētniecībā, jo īpaši pētot ģenētiskās izmaiņas un to lomu dzemdes kakla karcinogēnā. Šai šūnu līnijai ir raksturīgas unikālas ģenētiskās modifikācijas Smad4 gēnā, kur konkrēti eksoni ir aizstāti ar sekvencēm no citiem genoma apgabaliem, kā rezultātā tiek ekspresēti saīsināti un, iespējams, nefunkcionējoši Smad4 proteīni. Šīs izmaiņas sniedz ieskatu šūnas līnijas onkogēnajās īpašībās un molekulārajos mehānismos, kas ir dzemdes kakla vēža pamatā.

Zīmīgi, ka MRI-215 ir HPV45 pozitīva, tomēr tās Smad4 gēna izmaiņas nav atkarīgas no HPV integrācijas, kas liecina par sarežģītu ģenētisko faktoru mijiedarbību, kuri veicina vēža attīstību ārpus vīrusu ietekmes. Šī šūnu līnija kalpo kā nenovērtējams rīks pētniekiem, kas pievēršas vēža ģenētiskajiem aspektiem, Smad4 lomai audzēja progresēšanā un mijiedarbībai starp cilvēka papilomas vīrusu un saimnieka šūnas mehānismiem.

MRI-H215 piedāvā unikālu platformu dzemdes kakla vēža sarežģījumu izpētei molekulārā līmenī, padarot to par būtisku sastāvdaļu vēža pētniecības laboratorijās, kuru mērķis ir atklāt jaunus terapeitiskos mērķus un izprast audzēju ģenētisko pamatu.

Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Karcinoma
Sinonīmi
  • Cerv-215
  • MRI-H-215
  • MRI-H215

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epidermoīdā
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
CERV-215 (Cytion kataloga numurs 300292)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_5722

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
HPV-16 negatīvs
Produkti
Citokeratīns 8, 18, vimentīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
Ieteicams 1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
39 gadi
Etniskā piederība
Āfrikas