Skip to content
CERV-215
Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Synonyms
Cerv-215, MRI-H-215, MRI-H215

Documents

CERV-215

Cell line · Product number 300292

The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

สายเซลล์ CERV-215 ซึ่งก่อตั้งโดย ดร. บอดเจน ที่สถาบันวิจัยเมสัน มีต้นกำเนิดจากเซลล์ปลูกถ่ายข้ามสายพันธุ์ขั้นปฐมภูมิที่เรียกว่า MRI-H215 ซึ่งได้รับการปรับให้เหมาะสมสำหรับการปลูกถ่ายในสิ่งมีชีวิต

เซลล์ไลน์นี้เป็นรูปแบบที่รุนแรงของมะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมอิด จัดอยู่ในประเภทรุกราน เซลล์ขนาดใหญ่ ไม่เกิดการเคอราไทไนซ์ และมีการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ต่ำ

เซลล์ไลน์ Cerv-215 เป็นทรัพยากรสำคัญสำหรับการวิจัยโรคมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมและบทบาทของมันในการเกิดมะเร็งปากมดลูกเซลล์ไลน์นี้มีลักษณะเฉพาะจากการดัดแปลงทางพันธุกรรมที่ไม่เหมือนใครในยีน Smad4 ซึ่งเอ็กซอนเฉพาะถูกแทนที่ด้วยลำดับจากบริเวณอื่นในจีโนม ส่งผลให้เกิดการแสดงออกของโปรตีน Smad4 ที่ถูกตัดทอนและอาจไม่สามารถทำงานได้ การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับคุณสมบัติการก่อมะเร็งของเซลล์ไลน์และกลไกโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังมะเร็งปากมดลูก

ที่น่าสังเกตคือ MRI-215 มีผลบวกต่อ HPV45 แต่การเปลี่ยนแปลงของยีน Smad4 นั้นไม่ขึ้นอยู่กับการรวมตัวของ HPV ซึ่งบ่งชี้ถึงปฏิสัมพันธ์ที่ซับซ้อนของปัจจัยทางพันธุกรรมที่มีส่วนในการพัฒนาของมะเร็งนอกเหนือจากอิทธิพลของไวรัส สายเซลล์นี้ถือเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับนักวิจัยที่มุ่งเน้นด้านพันธุกรรมของมะเร็ง บทบาทของ Smad4 ในการพัฒนาของเนื้องอก และการปฏิสัมพันธ์ระหว่างเชื้อไวรัสฮิวแมนแพปพิลโลมาและกลไกของเซลล์เจ้าบ้าน

MRI-H215 นำเสนอแพลตฟอร์มที่ไม่เหมือนใครสำหรับการสำรวจความซับซ้อนของมะเร็งปากมดลูกในระดับโมเลกุล ทำให้เป็นส่วนประกอบที่จำเป็นของห้องปฏิบัติการวิจัยมะเร็งที่มุ่งค้นหาเป้าหมายการรักษาใหม่และทำความเข้าใจพื้นฐานทางพันธุกรรมของการเกิดเนื้องอก

Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Synonyms
  • Cerv-215
  • MRI-H-215
  • MRI-H215

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เอพิเดอร์โมอิด
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน

04Identifiers

Citation
CERV-215 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300292)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_5722

05Expression and susceptibility

Viruses
HPV-16 เป็นลบ
Products
ไซโตเคราติน 8, 18, วีเมนติน

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 104 เซลล์/ซม.2 แนะนำ
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
39 ปี
Ethnicity
แอฟริกัน