Gå til innholdet
CERV-215
Vev
Livmorhalsen
Sykdom
Karsinom
Synonymer
Cerv-215, MRI-H-215, MRI-H215

Dokumenter

CERV-215

Cell line · Produktnummer 300292

The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

CERV-215-cellelinjen, som ble etablert av Dr. Bodgen ved Mason Research Institute, stammer fra en primær xenotransplantasjon kalt MRI-H215, som har blitt tilpasset for in vivo-transplantasjon.

Denne cellelinjen representerer en aggressiv form for epidermoid karsinom, kategorisert som invasiv, storcellet, ikke-keratiniserende og dårlig differensiert.

Cerv-215-cellelinjen er en viktig ressurs for kreftforskningen, særlig når det gjelder studier av genetiske endringer og deres rolle i karsinogenesen i livmorhalsen. Denne cellelinjen kjennetegnes av unike genetiske modifikasjoner i Smad4-genet, der spesifikke eksoner er erstattet av sekvenser fra andre genomiske regioner, noe som fører til uttrykk av avkortede og sannsynligvis ikke-funksjonelle Smad4-proteiner. Disse endringene gir innsikt i cellelinjens onkogene egenskaper og de molekylære mekanismene som ligger til grunn for livmorhalskreft.

MRI-215 er HPV45-positiv, men endringene i Smad4-genet er uavhengige av HPV-integrasjon, noe som tyder på et komplekst samspill mellom genetiske faktorer som bidrar til kreftutvikling utover viruspåvirkning. Denne cellelinjen er et uvurderlig verktøy for forskere som fokuserer på de genetiske aspektene ved kreft, Smad4s rolle i tumorprogresjon og samspillet mellom humant papillomavirus og cellulære mekanismer i vertsorganismen.

MRI-H215 tilbyr en unik plattform for å utforske livmorhalskreft på molekylært nivå, noe som gjør den til en viktig komponent i kreftforskningslaboratorier som har som mål å avdekke nye terapeutiske mål og forstå det genetiske grunnlaget for tumorigenese.

Vev
Livmorhalsen
Sykdom
Karsinom
Synonymer
  • Cerv-215
  • MRI-H-215
  • MRI-H215

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epidermoid
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CERV-215 (Cytion-katalognummer 300292)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_5722

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
HPV-16 negativ
Produkter
Cytokeratin 8, 18, Vimentin

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2 anbefales
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
39 år
Etnisitet
Afrikansk