Přejít na obsah
CERV-215
Tkáň
Cervix
Nemoc
Karcinom
Synonyma
Cerv-215, MRI-H-215, MRI-H215

Dokumenty

CERV-215

Cell line · Číslo výrobku 300292

The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie CERV-215, kterou založil Dr. Bodgen v Masonově výzkumném ústavu, pochází z primárního xenotransplantátu označovaného MRI-H215, který byl upraven pro transplantaci in vivo.

Tato buněčná linie představuje agresivní formu epidermoidního karcinomu, který je klasifikován jako invazivní, velkobuněčný, nekeratinizující a špatně diferencovaný.

Buněčná linie Cerv-215 je klíčovým zdrojem pro výzkum rakoviny, zejména při studiu genetických změn a jejich role v karcinogenezi děložního hrdla. Tato buněčná linie se vyznačuje jedinečnými genetickými modifikacemi v genu Smad4, kde jsou specifické exony nahrazeny sekvencemi z jiných genomických oblastí, což vede k expresi zkrácených a pravděpodobně nefunkčních proteinů Smad4. Tyto změny umožňují nahlédnout do onkogenních vlastností buněčné linie a do molekulárních mechanismů, které jsou základem rakoviny děložního čípku.

Pozoruhodné je, že MRI-215 je HPV45 pozitivní, avšak její změny genu Smad4 jsou nezávislé na integraci HPV, což naznačuje komplexní souhru genetických faktorů přispívajících k rozvoji rakoviny mimo virové vlivy. Tato buněčná linie slouží jako neocenitelný nástroj pro výzkumníky zaměřené na genetické aspekty rakoviny, roli Smad4 v progresi nádoru a interakci mezi lidským papilomavirem a hostitelskými buněčnými mechanismy.

MRI-H215 nabízí jedinečnou platformu pro zkoumání složitostí rakoviny děložního čípku na molekulární úrovni, což z ní činí nezbytnou součást laboratoří pro výzkum rakoviny, jejichž cílem je odhalit nové terapeutické cíle a pochopit genetický základ nádorového bujení.

Tkáň
Cervix
Nemoc
Karcinom
Synonyma
  • Cerv-215
  • MRI-H-215
  • MRI-H215

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epidermoidní
Tumorogenní
Ano, u nahých myší

04Identifikátory

Citace
CERV-215 (katalogové číslo Cytion 300292)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5722

05Exprese a náchylnost

Viry
HPV-16 negativní
Produkty
Cytokeratin 8, 18, Vimentin

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
Doporučuje se 1 x 104 buněk/cm2.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
39 let
Etnická příslušnost
Africké