Przejdź do treści
CERV-215
Chusteczka
Szyjka macicy
Choroba
Rak
Synonimy
Cerv-215, MRI-H-215, MRI-H215

Dokumenty

CERV-215

Cell line · Numer produktu 300292

The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa CERV-215, stworzona przez dr Bodgena w Mason Research Institute, pochodzi z pierwotnego ksenotransplantu o nazwie MRI-H215, który został przystosowany do przeszczepów in vivo.

Ta linia komórkowa reprezentuje agresywną postać raka naskórka, sklasyfikowanego jako inwazyjny, wielkokomórkowy, nierogowaciejący i słabo zróżnicowany.

Linia komórkowa Cerv-215 jest kluczowym zasobem do badań nad rakiem, zwłaszcza w badaniach zmian genetycznych i ich roli w kancerogenezie szyjki macicy. Ta linia komórkowa charakteryzuje się unikalnymi modyfikacjami genetycznymi w genie Smad4, w których określone eksony są zastępowane sekwencjami z innych regionów genomu, co prowadzi do ekspresji skróconych i prawdopodobnie niefunkcjonalnych białek Smad4. Zmiany te zapewniają wgląd we właściwości onkogenne linii komórkowej i mechanizmy molekularne leżące u podstaw raka szyjki macicy.

Warto zauważyć, że MRI-215 jest HPV45 dodatnia, ale jej zmiany genu Smad4 są niezależne od integracji HPV, co sugeruje złożoną interakcję czynników genetycznych przyczyniających się do rozwoju raka poza wpływami wirusowymi. Ta linia komórkowa służy jako nieocenione narzędzie dla badaczy skupiających się na genetycznych aspektach raka, roli Smad4 w progresji nowotworu oraz interakcji między wirusem brodawczaka ludzkiego a mechanizmami komórkowymi gospodarza.

MRI-H215 oferuje unikalną platformę do badania zawiłości raka szyjki macicy na poziomie molekularnym, dzięki czemu jest niezbędnym elementem laboratoriów badawczych nad rakiem, których celem jest odkrycie nowych celów terapeutycznych i zrozumienie genetycznych podstaw nowotworzenia.

Chusteczka
Szyjka macicy
Choroba
Rak
Synonimy
  • Cerv-215
  • MRI-H-215
  • MRI-H215

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Epidermoid
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
CERV-215 (numer katalogowy Cytion 300292)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5722

05Ekspresja i podatność

Wirusy
HPV-16 ujemny
Produkty
Cytokeratyna 8, 18, wimentyna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
Zaleca się 1 x 104 komórek/cm2.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
39 lat
Pochodzenie etniczne
Afrykański