Перейти до вмісту
CERV-215
Тканина
Шийка матки
Хвороба
Карцинома
Синоніми
Cerv-215, MRI-H-215, MRI-H215

Документи

CERV-215

Cell line · Номер товару 300292

The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія CERV-215, створена доктором Бодгеном в Дослідницькому інституті Мейсона, походить від первинного ксенотрансплантата під назвою MRI-H215, який був адаптований для трансплантації in vivo.

Ця клітинна лінія представляє агресивну форму епідермоїдної карциноми, яка класифікується як інвазивна, великоклітинна, не ороговіла і погано диференційована.

Клітинна лінія Cerv-215 є ключовим ресурсом для дослідження раку, особливо у вивченні генетичних змін та їх ролі в канцерогенезі шийки матки. Ця лінія клітин характеризується унікальними генетичними модифікаціями в гені Smad4, де певні екзони замінені послідовностями з інших ділянок геному, що призводить до експресії усічених і, ймовірно, нефункціональних білків Smad4. Ці зміни дають уявлення про онкогенні властивості клітинної лінії та молекулярні механізми, що лежать в основі раку шийки матки.

Примітно, що MRI-215 є позитивною до ВПЛ45, проте зміни гена Smad4 не залежать від інтеграції ВПЛ, що свідчить про складну взаємодію генетичних факторів, які сприяють розвитку раку, окрім вірусних впливів. Ця клітинна лінія слугує безцінним інструментом для дослідників, які вивчають генетичні аспекти раку, роль Smad4 у прогресії пухлин та взаємодію між вірусом папіломи людини та клітинними механізмами організму хазяїна.

MRI-H215 пропонує унікальну платформу для вивчення тонкощів раку шийки матки на молекулярному рівні, що робить його невід'ємним компонентом онкологічних дослідницьких лабораторій, які прагнуть виявити нові терапевтичні мішені і зрозуміти генетичні основи пухлиногенезу.

Тканина
Шийка матки
Хвороба
Карцинома
Синоніми
  • Cerv-215
  • MRI-H-215
  • MRI-H215

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
2

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епідермоїдний
Пухлиноутворювальний
Так, у голих мишей

04Ідентифікатори

Посилання
CERV-215 (номер за каталогом Cytion 300292)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_5722

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
ВПЛ-16 негативний
Продукція
Цитокератин 8, 18, Віментин

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Рекомендується 1 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
39 років
Етнічна приналежність
Африканський