Mine otse sisu juurde
CERV-215
Kude
Emakakael
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
Cerv-215, MRI-H-215, MRI-H215

Dokumendid

CERV-215

Cell line · Toote number 300292

The CERV-215 cell line, established by Dr. Bodgen at the Mason Research Institute, originates from a primary xenotransplant termed MRI-H215, which has bee...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Dr. Bodgeni poolt Masoni uurimisinstituudis loodud CERV-215 rakuliin pärineb primaarsest ksenotransplantatsioonist, mida nimetatakse MRI-H215, mis on kohandatud in vivo siirdamiseks.

See rakuliin esindab epidermoidkartsinoomi agressiivset vormi, mis on liigitatud invasiivseks, suurrakuliseks, mittekeratiniseerivaks ja halvasti diferentseeritud.

Cerv-215 rakuliin on vähiuuringute jaoks keskne ressurss, eriti geneetiliste muutuste ja nende rolli uurimiseks emakakaela kantserogeensuses. Seda rakuliini iseloomustavad unikaalsed geneetilised muutused Smad4 geenis, kus teatud eksonid on asendatud teistest genoomi piirkondadest pärit järjestustega, mille tulemuseks on kärbitud ja tõenäoliselt mittefunktsionaalsete Smad4 valkude ekspressioon. Need muutused annavad ülevaate rakuliini onkogeensetest omadustest ja emakakaelavähi aluseks olevatest molekulaarsetest mehhanismidest.

MRI-215 on HPV45-positiivne, kuid selle Smad4-geeni muutused on sõltumatud HPV-integratsioonist, mis viitab sellele, et lisaks viiruse mõjudele on vähi arengule kaasa aidanud geneetiliste tegurite keerukas koostoime. See rakuliin on hindamatu väärtusega vahend teadlastele, kes keskenduvad vähi geneetilistele aspektidele, Smad4 rollile kasvaja progresseerumises ning inimese papilloomiviiruse ja peremehe rakumehhanismide vahelisele koostoimele.

MRI-H215 pakub ainulaadset platvormi emakakaelavähi keerukuse uurimiseks molekulaarsel tasandil, mistõttu on see oluline osa vähiuuringute laboratooriumides, mille eesmärk on avastada uusi terapeutilisi sihtmärke ja mõista kasvajate tekke geneetilisi aluseid.

Kude
Emakakael
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
  • Cerv-215
  • MRI-H-215
  • MRI-H215

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epidermoid
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
CERV-215 (Cytioni katalooginumber 300292)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_5722

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
HPV-16 negatiivne
Tooted
Tsütokeratiin 8, 18, vimentiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
Soovitatav on 1 x 104 rakku/cm2.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
39 aastat
Etniline kuuluvus
Aafrika