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IM95m
Pañuelo de papel
Estómago
Enfermedad
Adenocarcinoma gástrico
Sinónimos
IM95M, IM95 m, IM-95m

Documentos

IM95m

Cell line · Número de producto 305557

The IM95m cell line is derived from a moderately differentiated gastric adenocarcinoma and has been notable for its capacity to produce significant amount...

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01Información general

Descripción

La línea celular IM95m se deriva de un adenocarcinoma gástrico moderadamente diferenciado y destaca por su capacidad para producir cantidades significativas de citocinas, en particular el factor de crecimiento hepatocitario (HGF), el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) y la interleucina-8 (IL-8). Esta propiedad convierte a la IM95m en un valioso modelo para estudiar las interacciones entre el tumor y la angiogénesis, así como los mecanismos de proliferación y metástasis del cáncer. La línea celular presenta una morfología epitelial con conexiones intercelulares estrechas y un tiempo de duplicación calculado de aproximadamente 25 horas. La IM95m se estableció originalmente a partir de una muestra de cáncer gástrico y ha demostrado la capacidad de formar tumores in vivo, lo que indica su potencial tumorigénico.

La capacidad de IM95m para secretar altos niveles de HGF y VEGF es especialmente relevante para los estudios sobre la progresión del cáncer, ya que estos factores de crecimiento son impulsores clave de la angiogénesis y el crecimiento tumoral. La producción de HGF es continua y significativa, lo que potencia el potencial de IM95m para aportar conocimientos sobre el comportamiento de las vías oncológicas impulsadas por el HGF. La secreción de estos factores sugiere un papel de IM95m en el estudio de los mecanismos de resistencia a las terapias dirigidas, como los inhibidores del VEGFR, en los que la señalización mediada por el HGF puede influir en la disminución de la eficacia del tratamiento.

Además de su producción de citocinas asociadas a la angiogénesis, se ha evaluado la respuesta de IM95m en modelos experimentales relacionados con la inhibición del crecimiento tumoral. Su perfil de expresión respalda las investigaciones sobre estrategias terapéuticas que se dirigen simultáneamente a las vías del VEGF y del HGF, un enfoque que podría proporcionar resultados más completos en el tratamiento del cáncer.

Pañuelo de papel
Estómago
Enfermedad
Adenocarcinoma gástrico
Sinónimos
  • IM95M
  • IM95 m
  • IM-95m

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial

04Identificadores

Referencia
IM95m (número de catálogo de Cytion 305557)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2962

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con TrypLE Express, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezcle suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugue a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
63 años
Origen étnico
Japonés