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IM95m
Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma gastrico
Sinonimi
IM95M, IM95 m, IM-95m

Documenti

IM95m

Cell line · Codice prodotto 305557

The IM95m cell line is derived from a moderately differentiated gastric adenocarcinoma and has been notable for its capacity to produce significant amount...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare IM95m deriva da un adenocarcinoma gastrico moderatamente differenziato e si è distinta per la sua capacità di produrre quantità significative di citochine, in particolare il fattore di crescita degli epatociti (HGF), il fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) e l'interleuchina-8 (IL-8). Questa proprietà rende IM95m un modello prezioso per lo studio delle interazioni tra tumore e angiogenesi e dei meccanismi di proliferazione e metastasi del cancro. La linea cellulare presenta una morfologia epiteliale con connessioni intercellulari strette e un tempo di raddoppio calcolato di circa 25 ore. IM95m è stata originariamente ottenuta da un campione di cancro gastrico e ha dimostrato la capacità di formare tumori in vivo, indicando il suo potenziale tumorigenico.

La capacità di IM95m di secernere livelli elevati di HGF e VEGF è particolarmente rilevante per gli studi sulla progressione del cancro, poiché questi fattori di crescita sono fattori chiave dell'angiogenesi e della crescita tumorale. La produzione di HGF è continua e significativa, il che aumenta il potenziale di IM95m di fornire approfondimenti sul comportamento delle vie tumorali guidate dall'HGF. La secrezione di questi fattori suggerisce un ruolo per IM95m nello studio dei meccanismi di resistenza alle terapie mirate, come gli inibitori del VEGFR, dove la segnalazione mediata dall'HGF può giocare un ruolo nel diminuire l'efficacia del trattamento.

Oltre alla produzione di citochine associate all'angiogenesi, IM95m è stato valutato per la sua risposta in modelli sperimentali che prevedono l'inibizione della crescita tumorale. Il suo profilo di espressione supporta le indagini su strategie terapeutiche che prendono di mira contemporaneamente sia la via del VEGF che quella dell'HGF, un approccio che potrebbe fornire risultati più completi nel trattamento del cancro.

Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma gastrico
Sinonimi
  • IM95M
  • IM95 m
  • IM-95m

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
IM95m (codice catalogo Cytion 305557)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2962

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con TrypLE Express, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
63 anni
Etnia
Giapponese