IM95m

A linhagem celular IM95m é derivada de um adenocarcinoma gástrico moderadamente diferenciado e se destaca por sua capacidade de produzir quantidades significativas de citocinas, particularmente o fator de crescimento hepatocitário (HGF), o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e a interleucina-8 (IL-8). Essa propriedade posiciona a IM95m como um modelo valioso para a investigação das interações entre tumor e angiogênese, bem como dos mecanismos de proliferação e metástase do câncer. A linha celular apresenta morfologia epitelial com conexões intercelulares estreitas e um tempo de duplicação calculado em aproximadamente 25 horas. A IM95m foi originalmente estabelecida a partir de uma amostra de câncer gástrico e demonstrou a capacidade de formar tumores in vivo, indicando seu potencial tumorigênico.

A capacidade da IM95m de secretar altos níveis de HGF e VEGF é particularmente relevante para estudos sobre a progressão do câncer, uma vez que esses fatores de crescimento são os principais impulsionadores da angiogênese e do crescimento tumoral. A produção de HGF é contínua e significativa, o que aumenta o potencial da IM95m de contribuir com insights sobre o comportamento das vias do câncer impulsionadas pelo HGF. A secreção desses fatores sugere um papel para o IM95m no estudo de mecanismos de resistência a terapias direcionadas, como os inibidores de VEGFR, nas quais a sinalização mediada pelo HGF pode contribuir para diminuir a eficácia do tratamento.

Além da produção de citocinas associadas à angiogênese, o IM95m foi avaliado quanto à sua resposta em modelos experimentais envolvendo a inibição do crescimento tumoral. Seu perfil de expressão apoia investigações sobre estratégias terapêuticas que têm como alvo simultaneamente as vias do VEGF e do HGF, uma abordagem que poderia proporcionar resultados mais abrangentes no tratamento do câncer.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.