Pāriet uz saturu
IM95m
Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa adenokarcinoma
Sinonīmi
IM95M, IM95 m, IM-95m

Dokumenti

IM95m

Cell line · Preces numurs 305557

The IM95m cell line is derived from a moderately differentiated gastric adenocarcinoma and has been notable for its capacity to produce significant amount...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Šūnu līnija IM95m ir iegūta no vidēji diferencētas kuņģa adenokarcinomas un izceļas ar spēju ražot ievērojamu daudzumu citokīnu, jo īpaši hepatocītu augšanas faktoru (HGF), asinsvadu endotēlija augšanas faktoru (VEGF) un interleikīnu-8 (IL-8). Šī īpašība padara IM95m par vērtīgu modeli, lai pētītu mijiedarbību starp audzēju un angiogēnēzi, kā arī vēža proliferācijas un metastāžu mehānismus. Šī šūnu līnija izrāda epitēlija morfoloģiju ar ciešām starpšūnu saiknēm un aprēķinātu dubultošanās laiku aptuveni 25 stundas. IM95m sākotnēji tika izveidota no kuņģa vēža parauga un ir parādījusi spēju veidot audzējus in vivo, norādot uz tās tumorogēno potenciālu.

IM95m spēja izdalīt augstus HGF un VEGF līmeņus ir īpaši nozīmīga pētījumos par vēža progresēšanu, jo šie augšanas faktori ir galvenie angiogēnēzes un audzēja augšanas virzītājspēki. HGF ražošana ir nepārtraukta un nozīmīga, kas palielina IM95m potenciālu sniegt ieskatu HGF vadīto vēža ceļu darbībā. Šo faktoru sekrēcija liecina par IM95m lomu pētījumos par rezistences mehānismiem pret mērķtiecīgām terapijām, piemēram, VEGFR inhibitoriem, kur HGF mediēta signālu pārraide var ietekmēt ārstēšanas efektivitātes samazināšanos.

Papildus ar angiogēnēzi saistīto citokīnu ražošanai IM95m ir novērtēts arī attiecībā uz tā reakciju eksperimentālos modeļos, kas saistīti ar audzēja augšanas inhibīciju. Tā ekspresijas profils atbalsta pētījumus par terapeitiskām stratēģijām, kas vienlaikus vērstas gan uz VEGF, gan HGF ceļiem, un šāda pieeja varētu nodrošināt visaptverošākus vēža ārstēšanas rezultātus.

Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa adenokarcinoma
Sinonīmi
  • IM95M
  • IM95 m
  • IM-95m

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
IM95m (Cytion kataloga numurs 305557)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2962

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar TrypLE Express, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
63 gadi
Etniskā piederība
Japāņu