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IM95m
Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma gástrico
Sinónimos
IM95M, IM95 m, IM-95m

Documentos

IM95m

Cell line · Número do produto 305557

The IM95m cell line is derived from a moderately differentiated gastric adenocarcinoma and has been notable for its capacity to produce significant amount...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular IM95m é derivada de um adenocarcinoma gástrico moderadamente diferenciado e tem-se destacado pela sua capacidade de produzir quantidades significativas de citocinas, em particular o fator de crescimento hepatocitário (HGF), o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e a interleucina-8 (IL-8). Esta propriedade posiciona a IM95m como um modelo valioso para a exploração das interações entre o tumor e a angiogénese, bem como dos mecanismos de proliferação e metástase do cancro. A linha celular apresenta uma morfologia epitelial com ligações intercelulares estreitas e um tempo de duplicação calculado de aproximadamente 25 horas. A IM95m foi originalmente estabelecida a partir de uma amostra de cancro gástrico e demonstrou a capacidade de formar tumores in vivo, indicando o seu potencial tumorigénico.

A capacidade da IM95m de secretar níveis elevados de HGF e VEGF é particularmente relevante para estudos sobre a progressão do cancro, uma vez que estes fatores de crescimento são impulsionadores-chave da angiogénese e do crescimento tumoral. A produção de HGF é contínua e significativa, o que aumenta o potencial da IM95m para contribuir com insights sobre o comportamento das vias do cancro impulsionadas pelo HGF. A secreção destes fatores sugere um papel para a IM95m no estudo de mecanismos de resistência a terapias direcionadas, tais como inibidores de VEGFR, onde a sinalização mediada pelo HGF pode desempenhar um papel na diminuição da eficácia do tratamento.

Para além da sua produção de citocinas associadas à angiogénese, o IM95m foi avaliado quanto à sua resposta em modelos experimentais envolvendo a inibição do crescimento tumoral. O seu perfil de expressão apoia investigações sobre estratégias terapêuticas que visam simultaneamente as vias do VEGF e do HGF, uma abordagem que poderá proporcionar resultados mais abrangentes no tratamento do cancro.

Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma gástrico
Sinónimos
  • IM95M
  • IM95 m
  • IM-95m

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
IM95m (número de catálogo Cytion 305557)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2962

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Para frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e, para frascos T75, utilizar 5-10 ml. De seguida, cobrir completamente as células com TrypLE Express, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
63 anos
Etnia
Japonês