Mine otse sisu juurde
BV-173 rakud
Kude
Veri
Haigus
Krooniline müeloidne leukeemia

Dokumendid

BV-173 rakud

Cell line · Toote number 300133

Rakuliin BV-173 pärineb patsiendi perifeersest verest, kellel on diagnoositud Philadelphia-kromosoomi-positiivne (Ph+) krooniline müeloidleukeemia (CML...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

BV-173 rakuliin pärineb 1980. aastal diagnoositud Philadelphia kromosoomi positiivse (Ph+) kroonilise müeloidse leukeemiaga (CML) patsiendi perifeersest verest. Seda rakuliini iseloomustab eelkõige Ph+ staatus, mis viitab spetsiifilisele kromosoomianomaaliale, mis hõlmab kromosoomi 9 ja kromosoomi 22 vahelist translokatsiooni. See translokatsioon, mida sageli nimetatakse Philadelphia kromosoomiks, toob kaasa BCR-ABL-fusioonigeeni, mis on kriitiline molekulaarne tunnus, mis soodustab leukeemiarakkude proliferatsiooni ja ellujäämist ning põhjustab CMLi patogeneesi.

BV-173 rakke kasutatakse laialdaselt hematoloogilistes uuringutes CMLi rakuliste ja molekulaarsete mehhanismide uurimiseks, eriti seoses ravimresistentsuse ja rakkude vastusega türosiinkinaasi inhibiitoritele (TKI), mis on suunatud BCR-ABL fusioonvalgule. Rakuliin on olnud oluline prekliinilistes uuringutes uute ravistrateegiate hindamiseks ja CML-i bioloogia mõistmiseks. BV-173 omab müeloidse liini rakkudele iseloomulikke omadusi ja seda kasutatakse sageli BCR-ABL onkogeeni tõttu CML-is dereguleeritud signaalitransduktsiooniradade uurimiseks.

Kude
Veri
Haigus
Krooniline müeloidne leukeemia

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Diferentseerimata blastrakud
Ploidsus
T(9, 22) Modaalne arv: 2n=46
Kahekordistumisaeg
35 tundi

04Tunnused

Viide
BV-173 (Cytioni katalooginumber 300133)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0181

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
B2a2 BCR-ABL
Pöördtranskriptaas
Negatiivne (ELISA)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
1 x 105 rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Laske rakkudel vähemalt 48 tundi külmutamisest taastuda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
45 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia