Pāriet uz saturu
BV-173 šūnas
Audums
Asinis
Slimība
Hroniska mieloīdo leikēmija

Dokumenti

BV-173 šūnas

Cell line · Preces numurs 300133

BV-173 šūnu līnija ir iegūta no pacienta perifērās asinis, kuram diagnosticēta Filadelfijas hromosomas pozitīva (Ph+) hroniska mieloīdā leikēmija (CML...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

BV-173 šūnu līnija ir iegūta no 1980. gadā noteikta pacienta, kam diagnosticēta Filadelfijas hromosomu pozitīva (Ph+) hroniska mieloīdo leikēmija (HML), perifērajām asinīm. Šī šūnu līnija īpaši izceļas ar savu Ph+ statusu, kas norāda uz specifisku hromosomu anomāliju, kas ietver translokāciju starp 9. un 22. hromosomu. Šī translokācija, ko bieži dēvē par Filadelfijas hromosomu, rada BCR-ABL fusion gēnu, kas ir kritisks molekulārs raksturlielums, kurš nosaka CML patoģenēzi, veicinot leikēmisko šūnu proliferāciju un izdzīvošanu.

BV-173 šūnas tiek plaši izmantotas hematoloģiskajos pētījumos kā modelis, lai pētītu CML šūnu un molekulāros mehānismus, jo īpaši saistībā ar rezistenci pret zālēm un šūnu reakciju uz tirozīnkināzes inhibitoriem (TKI), kas ir vērsti pret BCR-ABL saplūšanas proteīnu. Šūnu līnija ir bijusi noderīga pirmsklīniskajos pētījumos, lai novērtētu jaunas terapeitiskās stratēģijas un izprastu KML bioloģiju. BV-173 piemīt mieloīdu līnijas šūnām raksturīgās īpašības, un to bieži izmanto, lai pētītu signālu pārneses ceļus, kas KML ir traucēti BCR-ABL onkogēna dēļ.

Audums
Asinis
Slimība
Hroniska mieloīdo leikēmija

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Nediferencētas blastveida šūnas
Ploidijas statuss
T(9, 22) Modālais skaitlis: 2n=46
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
35 stundas

04Identifikatori

Atsauce
BV-173 (Cytion kataloga numurs 300133)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0181

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
B2a2 BCR-ABL
Reversā transkriptāze
Negatīvs (ELISA)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Sēšanas blīvums
1 x 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Ļaujiet šūnām atgūties pēc sasaldēšanas procesa vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
45 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis