Siirry sisältöön
BV-173-solut
Kudos
Veri
Sairaus
Krooninen myelooinen leukemia

Asiakirjat

BV-173-solut

Cell line · Tuotenumero 300133

BV-173-solulinja on peräisin potilaan ääreisverestä, jolla on diagnosoitu Philadelphia-kromosomipositiivinen (Ph+) krooninen myelooinen leukemia (CML...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

BV-173-solulinja on peräisin Philadelphia-kromosomipositiivista (Ph+) kroonista myelooista leukemiaa (CML) sairastaneen potilaan perifeerisestä verestä, joka perustettiin vuonna 1980. Tämä solulinja on tunnettu erityisesti Ph+-statuksestaan, joka viittaa erityiseen kromosomipoikkeavuuteen, johon liittyy kromosomin 9 ja kromosomin 22 välinen translokaatio. Tämä translokaatio, jota usein kutsutaan Philadelphian kromosomiksi, johtaa BCR-ABL-fuusiogeeniin, joka on kriittinen molekulaarinen tunnusmerkki, joka ohjaa CML:n patogeneesiä edistämällä leukemiasolujen lisääntymistä ja eloonjäämistä.

BV-173-soluja käytetään laajalti hematologisessa tutkimuksessa mallina CML:n solu- ja molekyylimekanismien tutkimiseen, erityisesti lääkeresistenssin ja solujen vasteen osalta tyrosiinikinaasin estäjille (TKI), jotka kohdistuvat BCR-ABL-fuusioproteiiniin. Solulinja on ollut tärkeä prekliinisissä tutkimuksissa, joissa on arvioitu uusia hoitostrategioita ja ymmärretty CML:n biologiaa. BV-173:lla on myelooisen linjan soluille tyypillisiä ominaisuuksia, ja sitä käytetään usein tutkimaan signaalinvälitysreittejä, jotka ovat häiriintyneet CML:ssä BCR-ABL-onkogeenin vuoksi.

Kudos
Veri
Sairaus
Krooninen myelooinen leukemia

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Erilaistumattomat blastisolut
Ploidisuus
T(9, 22) Modaaliluku: 2n=46
Kaksinkertaistumisaika
35 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
BV-173 (Cytionin luettelonumero 300133)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0181

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
B2a2 BCR-ABL
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen (ELISA)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Soluviljely
Ylläpidä viljelmiä lisäämällä tai vaihtamalla kasvualusta säännöllisesti. Aloita viljelyt tiheydellä 5 x 105 solua/ml ja pidä solupitoisuus välillä 3 x 105 – 1 x 106 solua/ml optimaalisen kasvun saavuttamiseksi.
Kylvötiheys
1 x 105 solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Anna solujen palautua pakastuksesta vähintään 48 tuntia.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
45 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen