Přejít na obsah
Buňky BV-173
Tkáň
Krev
Nemoc
Chronická myeloidní leukémie

Dokumenty

Buňky BV-173

Cell line · Číslo výrobku 300133

Buněčná linie BV-173 pochází z periferní krve pacienta, u kterého byla diagnostikována chronická myeloidní leukémie (CML) s pozitivním Filadelfským chromozomem (Ph+)...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie BV-173 pochází z periferní krve pacienta s diagnózou chronické myeloidní leukemie (CML) s pozitivním filadelfským chromozomem (Ph+), která byla stanovena v roce 1980. Tato buněčná linie se vyznačuje zejména svým Ph+ statusem, který svědčí o specifické chromozomální abnormalitě zahrnující translokaci mezi chromozomem 9 a chromozomem 22. Tato translokace, často označovaná jako filadelfský chromozom, vede ke vzniku fúzního genu BCR-ABL, což je kritický molekulární znak, který podporuje patogenezi CML tím, že podporuje proliferaci a přežívání leukemických buněk.

Buňky BV-173 se v hematologickém výzkumu hojně využívají jako model pro studium buněčných a molekulárních mechanismů CML, zejména v souvislosti s rezistencí na léky a buněčnou odpovědí na inhibitory tyrozinkinázy (TKI), které jsou zaměřeny na fúzní protein BCR-ABL. Tato buněčná linie je důležitá v preklinických studiích pro hodnocení nových léčebných strategií a pochopení biologie CML. BV-173 vykazuje vlastnosti typické pro buňky myeloidní linie a často se používá ke studiu signálních transdukčních drah, které jsou u CML deregulovány v důsledku onkogenu BCR-ABL.

Tkáň
Krev
Nemoc
Chronická myeloidní leukémie

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Nediferencované blastické buňky
Ploidní stav
T(9, 22) Modální číslo: 2n=46
Doba zdvojnásobení
35 hodin

04Identifikátory

Citace
BV-173 (katalogové číslo Cytion 300133)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0181

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
B2a2 BCR-ABL
Reverzní transkriptáza
Negativní (ELISA)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS
Subkultivace
Kultury udržujte pravidelným přidáváním nebo výměnou média. Zahajte kultury s hustotou 5 x 105 buněk/ml a pro optimální růst udržujte koncentraci buněk v rozmezí 3 x 105 až 1 x 106 buněk/ml.
Hustota výsevu
1 x 105 buněk/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Nechte buňky zotavit z procesu zmrazení po dobu nejméně 48 hodin.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
45 let
Etnická příslušnost
Kavkazský