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Cellule BV-173
Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia mieloide cronica

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Cellule BV-173

Cell line · Codice prodotto 300133

La linea cellulare BV-173 proviene dal sangue periferico di un paziente a cui è stata diagnosticata una leucemia mieloide cronica (LMC) positiva al cromosoma di Filadelfia (Ph+)...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare BV-173 proviene dal sangue periferico di un paziente con diagnosi di leucemia mieloide cronica (LMC) positiva per il cromosoma Philadelphia (Ph+), creata nel 1980. Questa linea cellulare è particolarmente nota per il suo stato Ph+, che è indicativo di una specifica anomalia cromosomica che coinvolge la traslocazione tra il cromosoma 9 e il cromosoma 22. Questa traslocazione, spesso indicata come Ph+, è stata definita come un'anomalia cromosomica. Questa traslocazione, spesso indicata come cromosoma Philadelphia, determina il gene di fusione BCR-ABL, un segno distintivo molecolare critico che guida la patogenesi della CML promuovendo la proliferazione e la sopravvivenza delle cellule leucemiche.

Le cellule BV-173 sono ampiamente utilizzate nella ricerca ematologica come modello per studiare i meccanismi cellulari e molecolari della LMC, in particolare nel contesto della resistenza ai farmaci e della risposta cellulare agli inibitori della tirosin-chinasi (TKI), che hanno come bersaglio la proteina di fusione BCR-ABL. La linea cellulare è stata fondamentale negli studi preclinici per la valutazione di nuove strategie terapeutiche e la comprensione della biologia della LMC. La BV-173 presenta caratteristiche tipiche delle cellule del lignaggio mieloide e viene spesso utilizzata per studiare le vie di trasduzione del segnale che sono deregolate nella CML a causa dell'oncogene BCR-ABL.

Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia mieloide cronica

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tipo di cellula
Cellule blastiche indifferenziate
Stato di ploidia
T(9, 22) Numero modale: 2n=46
Tempo di raddoppio
35 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
BV-173 (numero di catalogo Cytion 300133)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0181

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
B2a2 BCR-ABL
Trascriptasi inversa
Negativo (ELISA)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare compresa tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
Densità di semina
1 x 105 cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
45 anni
Etnia
Caucasico