Cellules NCH612

NCH612 est une lignée cellulaire oligodendrocytaire dérivée de patients qui provient de tissus cérébraux humains et sert de modèle de recherche pertinent pour l'oligodendrogliome anaplasique (grade III de l'OMS). Cette lignée cellulaire est porteuse de la mutation IDH1 R132H, une altération génétique caractéristique fréquemment associée aux oligodendrogliomes. Cette mutation entraîne des modifications épigénétiques, notamment le phénotype de méthylateur d'îlots CpG de gliome (G-CIMP), qui contribue au développement et à la progression de la tumeur. NCH612 présente notamment une délétion partielle des bras chromosomiques 1p et 19q, une caractéristique génétique couramment rencontrée dans les oligodendrogliomes et associée à un meilleur pronostic et à une meilleure réponse à certaines thérapies.

Des études ont démontré que NCH612 est particulièrement sensible à l'inhibiteur de l'ADN méthyltransférase, la décitabine (DAC). Le traitement par DAC entraîne une réduction de la prolifération cellulaire et de la formation de colonies, principalement par la régulation à la baisse de TERT (transcriptase inverse de la télomérase) et la régulation à la hausse de p21, un inhibiteur de la kinase cycline-dépendante impliqué dans la réponse aux lésions de l'ADN. Il est intéressant de noter que cette sensibilité semble être liée à la présence de la mutation IDH1 et de la codélétion 1p/19q, car d'autres lignées cellulaires de gliome mutant IDH1 sans cette délétion, telles que NCH1681, présentent une résistance au DAC. Ces résultats suggèrent que les thérapies épigénétiques comme le DAC pourraient être particulièrement efficaces dans les oligodendrogliomes anaplasiques mutants IDH1 avec codélétion 1p/19q.

D'autres études moléculaires révèlent que le traitement au DAC dans les cellules NCH612 entraîne l'enrichissement des voies liées à la réplication de l'ADN, à la régulation du cycle cellulaire et à la fonction lysosomale, ce qui met en lumière le mécanisme d'action du médicament. La répression de TERT par DAC est médiée par p21, soulignant le rôle critique de cette voie dans la réponse à la thérapie épigénétique. Compte tenu de son profil génétique et épigénétique bien défini, NCH612 représente un modèle in vitro précieux pour l'étude de la biologie des oligodendrogliomes anaplasiques et pour le développement de thérapies ciblées sur les tumeurs mutantes IDH1 avec codélétion 1p/19q.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie