NCH612 šūnas

NCH612 ir no pacienta iegūta oligodendrocītisko šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka smadzeņu audiem un kalpo kā atbilstošs anaplastiskās oligodendrogliomas (PVO III pakāpes) izpētes modelis. Šī šūnu līnija satur IDH1 R132H mutāciju, kas ir raksturīga ģenētiska izmaiņa, kura bieži saistīta ar oligodendrogliomām. Mutācija izraisa epigenētiskas modifikācijas, tostarp gliomas CpG salu metilatora fenotipu (G-CIMP), kas veicina audzēja attīstību un progresēšanu. NCH612 piemīt daļēja 1p un 19q hromosomu atzaru delecija, kas ir oligodendrogliomām bieži sastopama ģenētiska īpašība un ir saistīta ar labāku prognozi un atbildes reakciju uz noteiktām terapijām.

Pētījumi liecina, ka NCH612 ir īpaši jutīgs pret DNS metiltransferāzes inhibitoru decitabīnu (DAC). Ārstēšanas ar DAC rezultātā samazinās šūnu proliferācija un koloniju veidošanās, galvenokārt samazinot TERT (telomerāzes reversās transkriptazes) un paaugstinot ciklīnneatkarīgās kināzes inhibitora p21, kas ir iesaistīts DNS bojājumu reakcijā, regulāciju. Interesanti, ka šī jutība, šķiet, ir saistīta gan ar IDH1 mutāciju, gan ar 1p/19q kodu, jo citas IDH1 mutantu gliomas šūnu līnijas bez šīs delecijas, piemēram, NCH1681, ir rezistentas pret DAC. Šie atklājumi liecina, ka tādas epigenētiskās terapijas kā DAC varētu būt īpaši efektīvas IDH1 mutantu anaplastiskām oligodendrogliomām ar 1p/19q kodu.

Turpmākie molekulārie pētījumi atklāj, ka DAC terapija NCH612 šūnās izraisa ar DNS replikāciju, šūnu cikla regulāciju un lizosomu funkciju saistītu ceļu bagātināšanos, tādējādi izgaismojot zāļu darbības mehānismu. TERT apspiešanu ar DAC nodrošina p21, uzsverot šī ceļa izšķirošo nozīmi reakcijā uz epigenētisko terapiju. Ņemot vērā labi definēto ģenētisko un epigenētisko profilu, NCH612 ir vērtīgs in vitro modelis anaplastisko oligodendrogliomu bioloģijas izpētei un mērķtiecīgas terapijas izstrādei, kas vērsta uz IDH1-mutantu audzējiem ar 1p/19q kodu.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu