NCH612 Cellen

NCH612 is een van patiënten afkomstige oligodendrocytaire cellijn die afkomstig is van menselijk hersenweefsel en dient als relevant onderzoeksmodel voor anaplastisch oligodendroglioma (WHO-rang III). Deze cellijn bevat de IDH1 R132H-mutatie, een kenmerkende genetische verandering die vaak wordt geassocieerd met oligodendrogliomen. De mutatie leidt tot epigenetische modificaties, waaronder het glioom CpG eiland methylator fenotype (G-CIMP), dat bijdraagt aan de ontwikkeling en progressie van tumoren. Met name vertoont NCH612 een gedeeltelijke deletie van chromosoomarmen 1p en 19q, een genetisch kenmerk dat vaak wordt aangetroffen bij oligodendrogliomen en geassocieerd wordt met een betere prognose en respons op bepaalde therapieën.

Studies hebben aangetoond dat NCH612 bijzonder gevoelig is voor de DNA-methyltransferaseremmer decitabine (DAC). Behandeling met DAC resulteert in verminderde celproliferatie en kolonievorming, voornamelijk door de downregulatie van TERT (telomerase reverse transcriptase) en de upregulatie van p21, een cycline-afhankelijke kinaseremmer die betrokken is bij de DNA-schaderespons. Interessant genoeg lijkt deze gevoeligheid verband te houden met de aanwezigheid van zowel de IDH1-mutatie als de 1p/19q codetie, aangezien andere IDH1-mutante glioomcellijnen zonder deze deletie, zoals NCH1681, resistentie vertonen tegen DAC. Deze bevindingen suggereren dat epigenetische therapieën zoals DAC bijzonder effectief zouden kunnen zijn in IDH1-mutante anaplastische oligodendrogliomen met 1p/19q codeletie.

Verder moleculair onderzoek laat zien dat DAC-behandeling in NCH612-cellen leidt tot de verrijking van pathways die gerelateerd zijn aan DNA-replicatie, celcyclusregulatie en lysosomale functie, wat licht werpt op het werkingsmechanisme van het geneesmiddel. De repressie van TERT door DAC wordt gemedieerd door p21, wat de kritische rol van deze pathway in de respons op epigenetische therapie benadrukt. Gezien het goed gedefinieerde genetische en epigenetische profiel is NCH612 een waardevol in vitro model voor het bestuderen van de biologie van anaplastische oligodendrogliomen en voor het ontwikkelen van gerichte therapieën gericht op IDH1-mutante tumoren met 1p/19q codeletie.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring