Cellule NCH612

NCH612 è una linea cellulare oligodendrocitaria derivata da un paziente, che proviene da tessuto cerebrale umano e serve come modello di ricerca per l'oligodendroglioma anaplastico (grado III dell'OMS). Questa linea cellulare è portatrice della mutazione IDH1 R132H, un'alterazione genetica caratteristica frequentemente associata agli oligodendrogliomi. La mutazione porta a modifiche epigenetiche, tra cui il fenotipo di metilatore delle isole CpG del glioma (G-CIMP), che contribuisce allo sviluppo e alla progressione del tumore. In particolare, NCH612 presenta una delezione parziale dei bracci cromosomici 1p e 19q, una caratteristica genetica comunemente riscontrata negli oligodendrogliomi e associata a una migliore prognosi e risposta a determinate terapie.

Gli studi hanno dimostrato che NCH612 è particolarmente sensibile all'inibitore della DNA metiltransferasi decitabina (DAC). Il trattamento con DAC determina una riduzione della proliferazione cellulare e della formazione di colonie, principalmente attraverso la downregulation di TERT (telomerasi trascrittasi inversa) e la upregulation di p21, un inibitore della chinasi ciclina-dipendente coinvolto nella risposta al danno al DNA. È interessante notare che questa sensibilità sembra essere legata alla presenza della mutazione IDH1 e della codelezione 1p/19q, poiché altre linee cellulari di glioma mutanti IDH1 senza questa delezione, come NCH1681, mostrano resistenza al DAC. Questi risultati suggeriscono che le terapie epigenetiche come la DAC potrebbero essere particolarmente efficaci negli oligodendrogliomi anaplastici IDH1-mutanti con codelezione 1p/19q.

Ulteriori indagini molecolari rivelano che il trattamento con DAC nelle cellule NCH612 porta all'arricchimento delle vie legate alla replicazione del DNA, alla regolazione del ciclo cellulare e alla funzione lisosomiale, facendo luce sul meccanismo d'azione del farmaco. La repressione di TERT da parte di DAC è mediata da p21, sottolineando il ruolo critico di questa via nella risposta alla terapia epigenetica. Dato il suo profilo genetico ed epigenetico ben definito, NCH612 rappresenta un modello in vitro prezioso per lo studio della biologia degli oligodendrogliomi anaplastici e per lo sviluppo di terapie mirate ai tumori IDH1-mutanti con codelezione 1p/19q.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia