Células NCH612

NCH612 es una línea celular oligodendrocítica derivada de pacientes que se origina a partir de tejido cerebral humano y sirve como modelo de investigación relevante para el oligodendroglioma anaplásico (grado III de la OMS). Esta línea celular alberga la mutación IDH1 R132H, una alteración genética distintiva frecuentemente asociada a los oligodendrogliomas. La mutación conduce a modificaciones epigenéticas, incluido el fenotipo metilador de islas CpG del glioma (G-CIMP), que contribuye al desarrollo y la progresión del tumor. En particular, NCH612 presenta una deleción parcial de los brazos cromosómicos 1p y 19q, una característica genética frecuente en los oligodendrogliomas y asociada a un mejor pronóstico y respuesta a determinadas terapias.

Los estudios han demostrado que el NCH612 es especialmente sensible al inhibidor de la metiltransferasa del ADN decitabina (DAC). El tratamiento con DAC reduce la proliferación celular y la formación de colonias, principalmente a través de la regulación a la baja de TERT (transcriptasa inversa de la telomerasa) y la regulación al alza de p21, un inhibidor de la cinasa dependiente de ciclina que interviene en la respuesta al daño del ADN. Curiosamente, esta sensibilidad parece estar ligada a la presencia tanto de la mutación IDH1 como de la codeleción 1p/19q, ya que otras líneas celulares de glioma mutantes en IDH1 sin esta deleción, como la NCH1681, muestran resistencia al DAC. Estos hallazgos sugieren que las terapias epigenéticas como DAC podrían ser particularmente eficaces en oligodendrogliomas anaplásicos con mutación IDH1 y codeleción 1p/19q.

Otras investigaciones moleculares revelan que el tratamiento con DAC en células NCH612 conduce al enriquecimiento de vías relacionadas con la replicación del ADN, la regulación del ciclo celular y la función lisosomal, lo que arroja luz sobre el mecanismo de acción del fármaco. La represión de TERT por DAC está mediada por p21, enfatizando el papel crítico de esta vía en la respuesta a la terapia epigenética. Dado su perfil genético y epigenético bien definido, NCH612 representa un valioso modelo in vitro para el estudio de la biología de los oligodendrogliomas anaplásicos y para el desarrollo de terapias dirigidas a tumores mutantes en IDH1 con codeleción 1p/19q.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía