NCH612-celler

NCH612 er en pasientavledet oligodendrocytisk cellelinje som stammer fra humant hjernevev, og som fungerer som en relevant forskningsmodell for anaplastisk oligodendrogliom (WHO grad III). Denne cellelinjen har IDH1 R132H-mutasjonen, en karakteristisk genetisk endring som ofte er forbundet med oligodendrogliomer. Mutasjonen fører til epigenetiske modifikasjoner, inkludert gliom CpG-øy-metyleringsfenotypen (G-CIMP), som bidrar til tumorutvikling og progresjon. NCH612 har en partiell delesjon av kromosomarmene 1p og 19q, en genetisk egenskap som ofte forekommer i oligodendrogliomer, og som er forbundet med bedre prognose og respons på visse behandlingsformer.

Studier har vist at NCH612 er spesielt følsom for DNA-metyltransferasehemmeren decitabin (DAC). Behandling med DAC fører til redusert celleproliferasjon og kolonidannelse, først og fremst gjennom nedregulering av TERT (telomerase revers transkriptase) og oppregulering av p21, en syklinavhengig kinasehemmer som er involvert i DNA-skaderesponsen. Interessant nok ser denne følsomheten ut til å være knyttet til tilstedeværelsen av både IDH1-mutasjonen og 1p/19q-kodeletjonen, ettersom andre IDH1-muterte gliomcellelinjer uten denne delesjonen, for eksempel NCH1681, viser resistens mot DAC. Disse funnene tyder på at epigenetiske terapier som DAC kan være spesielt effektive i IDH1-mutante anaplastiske oligodendrogliomer med 1p/19q-kodeletjon.

Ytterligere molekylære undersøkelser viser at DAC-behandling i NCH612-celler fører til en anrikning av signalveier knyttet til DNA-replikasjon, cellesyklusregulering og lysosomal funksjon, noe som kaster lys over stoffets virkningsmekanisme. DACs undertrykkelse av TERT medieres av p21, noe som understreker den kritiske rollen denne signalveien spiller i responsen på epigenetisk terapi. På grunn av sin veldefinerte genetiske og epigenetiske profil representerer NCH612 en verdifull in vitro-modell for å studere biologien til anaplastiske oligodendrogliomer og for å utvikle målrettede terapier rettet mot IDH1-mutante svulster med 1p/19q-kodeletjon.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring