Buňky NCH612

NCH612 je oligodendrocytární buněčná linie odvozená od pacienta, která pochází z lidské mozkové tkáně a slouží jako vhodný model pro výzkum anaplastického oligodendrogliomu (WHO grade III). Tato buněčná linie obsahuje mutaci IDH1 R132H, což je charakteristická genetická změna často spojovaná s oligodendrogliomy. Mutace vede k epigenetickým modifikacím, včetně fenotypu gliomového metylátoru ostrovů CpG (G-CIMP), který přispívá k rozvoji a progresi nádoru. NCH612 vykazuje zejména částečnou deleci ramen chromozomu 1p a 19q, což je genetická charakteristika, která se běžně vyskytuje u oligodendrogliomů a je spojena s lepší prognózou a odpovědí na některé terapie.

Studie prokázaly, že NCH612 je obzvláště citlivý na inhibitor DNA metyltransferázy decitabin (DAC). Léčba DAC vede ke snížení buněčné proliferace a tvorby kolonií, především prostřednictvím downregulace TERT (telomerázové reverzní transkriptázy) a upregulace p21, inhibitoru cyklin-dependentní kinázy, který se podílí na reakci na poškození DNA. Zajímavé je, že tato citlivost zřejmě souvisí s přítomností mutace IDH1 i kodelece 1p/19q, protože jiné buněčné linie gliomů s mutací IDH1 bez této delece, jako je NCH1681, vykazují rezistenci vůči DAC. Tato zjištění naznačují, že epigenetické terapie, jako je DAC, by mohly být účinné zejména u anaplastických oligodendrogliomů s mutací IDH1 a kodelecí 1p/19q.

Další molekulární výzkumy odhalily, že léčba DAC v buňkách NCH612 vede k obohacení drah souvisejících s replikací DNA, regulací buněčného cyklu a lysozomální funkcí, což vrhá světlo na mechanismus účinku léku. Represe TERT působením DAC je zprostředkována p21, což zdůrazňuje kritickou roli této dráhy v odpovědi na epigenetickou terapii. Vzhledem k dobře definovanému genetickému a epigenetickému profilu představuje NCH612 cenný in vitro model pro studium biologie anaplastických oligodendrogliomů a pro vývoj cílené terapie zaměřené na IDH1-mutované nádory s kodelecí 1p/19q.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení