NCH612細胞

NCH612は、ヒトの脳組織に由来する患者由来の乏突起膠細胞株であり、退形成性乏突起膠腫（WHO悪性度III）の関連研究モデルとなっている。この細胞株はIDH1 R132H変異を保有しており、これは乏突起膠腫にしばしばみられる特徴的な遺伝子変化である。この変異は、神経膠腫のCpG島メチル化表現型（G-CIMP）を含むエピジェネティックな修飾を引き起こし、腫瘍の発生と進行に寄与する。注目すべきことに、NCH612は染色体1pと19qの部分欠失を示し、これは乏突起膠腫によく見られる遺伝的特徴であり、予後の改善や特定の治療に対する反応性と関連している。

研究により、NCH612はDNAメチル化酵素阻害剤デシタビン（DAC）に対して特に感受性が高いことが示されている。DACによる治療は、主にTERT（テロメラーゼ逆転写酵素）のダウンレギュレーションとDNA損傷応答に関与するサイクリン依存性キナーゼ阻害剤p21のアップレギュレーションを介して、細胞増殖とコロニー形成を低下させる。興味深いことに、この感受性はIDH1変異と1p/19qコードレーションの両方に関連しているようで、NCH1681のようなこの欠失のない他のIDH1変異グリオーマ細胞株はDACに抵抗性を示す。これらの所見は、DACのようなエピジェネティック療法が、1p/19q欠失を有するIDH1変異型未分化乏突起膠腫に特に有効である可能性を示唆している。

さらに分子生物学的研究を進めると、NCH612細胞にDACを投与すると、DNA複製、細胞周期制御、リソソーム機能に関連する経路が濃縮されることが明らかになり、この薬剤の作用機序に光が当てられた。DACによるTERTの抑制はp21によって媒介され、エピジェネティック治療に対する反応におけるこの経路の重要な役割を強調している。NCH612は、その遺伝的およびエピジェネティックなプロフィールが明確に定義されていることから、退形成性乏突起膠腫の生物学を研究し、1p/19qコードレーションを有するIDH1変異腫瘍を標的とした標的療法を開発するための貴重なin vitroモデルである。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。