Bunky NCH612

NCH612 je línia oligodendrocytárnych buniek odvodená od pacienta, ktorá pochádza z ľudského mozgového tkaniva a slúži ako relevantný výskumný model pre anaplastický oligodendroglióm (WHO grade III). Táto bunková línia obsahuje mutáciu IDH1 R132H, charakteristickú genetickú zmenu, ktorá sa často spája s oligodendrogliómami. Mutácia vedie k epigenetickým modifikáciám vrátane fenotypu gliómového metylátora ostrovov CpG (G-CIMP), ktorý prispieva k rozvoju a progresii nádoru. NCH612 vykazuje najmä čiastočnú deléciu ramien chromozómu 1p a 19q, čo je genetická charakteristika, ktorá sa bežne vyskytuje u oligodendrogliómov a spája sa s lepšou prognózou a odpoveďou na určité terapie.

Štúdie preukázali, že NCH612 je obzvlášť citlivý na inhibítor metyltransferázy DNA decitabín (DAC). Liečba DAC vedie k zníženiu proliferácie buniek a tvorby kolónií, a to predovšetkým prostredníctvom zníženia regulácie TERT (telomerázovej reverznej transkriptázy) a zvýšenia regulácie p21, inhibítora cyklín-dependentnej kinázy, ktorý sa podieľa na reakcii na poškodenie DNA. Zaujímavé je, že táto citlivosť zrejme súvisí s prítomnosťou mutácie IDH1 aj s deléciou kódu 1p/19q, keďže iné bunkové línie gliómov s mutáciou IDH1 bez tejto delécie, ako napríklad NCH1681, vykazujú rezistenciu voči DAC. Tieto zistenia naznačujú, že epigenetické terapie, ako je DAC, by mohli byť obzvlášť účinné pri anaplastických oligodendrogliómoch s mutáciou IDH1 a kodeleciou 1p/19q.

Ďalšie molekulárne výskumy odhalili, že liečba DAC v bunkách NCH612 vedie k obohateniu dráh súvisiacich s replikáciou DNA, reguláciou bunkového cyklu a lyzozomálnou funkciou, čo vrhá svetlo na mechanizmus účinku lieku. Represia TERT pomocou DAC je sprostredkovaná p21, čo zdôrazňuje kritickú úlohu tejto dráhy v odpovedi na epigenetickú liečbu. Vzhľadom na dobre definovaný genetický a epigenetický profil predstavuje NCH612 cenný in vitro model na štúdium biológie anaplastických oligodendrogliómov a na vývoj cielenej terapie zameranej na IDH1-mutantné nádory s kodeleciou 1p/19q.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke