תאי NCH612

NCH612 הוא קו תאים אוליגודנדרוציטיים שמקורו ברקמת מוח אנושית ומשמש כמודל מחקר רלוונטי לאוליגודנדרוגליומה אנאפלסטית (דרגה III של ארגון הבריאות העולמי). קו תאים זה נושא את המוטציה IDH1 R132H, שינוי גנטי אופייני הקשור לעתים קרובות לאוליגודנדרוגליומות. המוטציה מובילה לשינויים אפיגנטיים, כולל פנוטיפ מתילציה של אי CpG בגליומה (G-CIMP), התורם להתפתחות ולהתקדמות הגידול. יש לציין כי NCH612 מציג מחיקה חלקית של זרועות הכרומוזומים 1p ו-19q, מאפיין גנטי הנפוץ באוליגודנדרוגליומות וקשור לפרוגנוזה טובה יותר ותגובה טובה יותר לטיפולים מסוימים.

מחקרים הראו כי NCH612 רגיש במיוחד למעכב DNA methyltransferase decitabine (DAC). טיפול ב-DAC מביא להפחתת התרבות התאים והיווצרות מושבות, בעיקר באמצעות ויסות כלפי מטה של TERT (telomerase reverse transcriptase) וויסות כלפי מעלה של p21, מעכב קינאז תלוי-ציקלין המעורב בתגובה לנזק ל-DNA. מעניין לציין כי רגישות זו קשורה ככל הנראה לנוכחות הן של מוטציה ב-IDH1 והן של מחיקה משותפת של 1p/19q, שכן קווי תאים אחרים של גליומה עם מוטציה ב-IDH1 ללא מחיקה זו, כגון NCH1681, מפגינים עמידות ל-DAC. ממצאים אלה מצביעים על כך שטיפולים אפיגנטיים כמו DAC עשויים להיות יעילים במיוחד באנפלסטית אוליגודנדרוגליומה עם מוטציה ב-IDH1 ו-1p/19q codeletion.

מחקרים מולקולריים נוספים מגלים כי טיפול ב-DAC בתאי NCH612 מוביל להעשרת מסלולים הקשורים לשכפול DNA, ויסות מחזור התא ותפקוד ליזוזומלי, מה שמאיר אור על מנגנון הפעולה של התרופה. דיכוי TERT על ידי DAC מתווך על ידי p21, מה שמדגיש את התפקיד הקריטי של מסלול זה בתגובה לטיפול אפיגנטי. בהתחשב בפרופיל הגנטי והאפיגנטי המוגדר היטב שלו, NCH612 מהווה מודל חשוב במבחנה לחקר הביולוגיה של אוליגודנדרוגליומות אנאפלסטיות ולפיתוח טיפולים ממוקדים המיועדים לגידולים עם מוטציה ב-IDH1 עם מחיקה משותפת של 1p/19q.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו