خلايا NCH612

NCH612 هو خط خلوي قليل التغصن قليل التغصن مشتق من المريض ينشأ من نسيج دماغي بشري ويُستخدم كنموذج بحثي مناسب للورم قليل التغصن الكشمي (الدرجة الثالثة لمنظمة الصحة العالمية). يحتوي هذا الخط الخلوي على طفرة IDH1 R132H، وهو تغير جيني مميز يرتبط بشكل متكرر بالأورام الدبقية قليلة التغصن. وتؤدي هذه الطفرة إلى تعديلات لاجينية بما في ذلك النمط الظاهري لميثيل الجزر الدبقية CpG (G-CIMP)، والذي يساهم في تطور الورم وتطوره. والجدير بالذكر أن NCH612 يُظهر حذفًا جزئيًا لأذرع الكروموسوم 1p و19q، وهي خاصية وراثية شائعة في الأورام الدبقية قليلة التغصنات وترتبط بتحسن التشخيص والاستجابة لبعض العلاجات.

وقد أظهرت الدراسات أن NCH612 حساس بشكل خاص لمثبط ميثيل الترانسفيراز للحمض النووي ديسيتابين (DAC). ويؤدي العلاج باستخدام ديكيتابين إلى انخفاض تكاثر الخلايا وتكوين المستعمرات، وذلك في المقام الأول من خلال تقليل تنظيم إنزيم تيلوميراز النسخ العكسي (TERT) وزيادة تنظيم p21، وهو مثبط كيناز معتمد على السيكلين يشارك في استجابة تلف الحمض النووي. ومن المثير للاهتمام، يبدو أن هذه الحساسية مرتبطة بوجود كل من طفرة IDH1 وحذف الشفرة 1p/19q، حيث أن خطوط الخلايا الدبقية الأخرى التي تحتوي على طفرات IDH1 دون هذا الحذف، مثل NCH1681، تظهر مقاومة لـ DAC. تشير هذه النتائج إلى أن العلاجات اللاجينية مثل DAC يمكن أن تكون فعالة بشكل خاص في الأورام الدبقية قليلة التغصن الكشمية المتحوّرة IDH1 مع حذف رمز 1p/19q.

وتكشف المزيد من التحقيقات الجزيئية أن العلاج بدواء DAC في خلايا NCH612 يؤدي إلى إثراء المسارات المتعلقة بتكرار الحمض النووي، وتنظيم دورة الخلية، ووظيفة الليزوزومات، مما يلقي الضوء على آلية عمل الدواء. يتم كبح TERT بواسطة DAC بوساطة p21، مما يؤكد الدور الحاسم لهذا المسار في الاستجابة للعلاج اللاجيني. ونظراً لخصائصه الوراثية والوراثية اللاجينية المحددة جيداً، يمثل NCH612 نموذجاً مختبرياً قيماً لدراسة بيولوجيا الأورام الدبقية قليلة التغصن الكشمية وتطوير علاجات موجهة تستهدف الأورام الطافرة ذات الورم المتحول IDH1 مع حذف شفرة 1p/19q.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان