Cellules NCH612

La lignée cellulaire NCH612 est une lignée oligodendrocytaire dérivée d’un patient, issue de tissu cérébral humain, qui constitue un modèle de recherche pertinent pour l’oligodendrogliome anaplasique (grade III selon l’OMS). Cette lignée cellulaire porte la mutation IDH1 R132H, une altération génétique caractéristique fréquemment associée aux oligodendrogliomes. Cette mutation entraîne des modifications épigénétiques, notamment le phénotype de méthylation des îlots CpG des gliomes (G-CIMP), qui contribue au développement et à la progression de la tumeur. Il convient de noter que la lignée NCH612 présente une délétion partielle des bras chromosomiques 1p et 19q, une caractéristique génétique couramment observée dans les oligodendrogliomes et associée à un meilleur pronostic ainsi qu’à une meilleure réponse à certaines thérapies.

Des études ont démontré que le NCH612 est particulièrement sensible à la décitabine (DAC), un inhibiteur de la méthyltransférase d’ADN. Le traitement par la DAC entraîne une réduction de la prolifération cellulaire et de la formation de colonies, principalement par la régulation à la baisse de TERT (transcriptase inverse de la télomérase) et la régulation à la hausse de p21, un inhibiteur de kinase dépendant des cyclines impliqué dans la réponse aux dommages à l’ADN. Il est intéressant de noter que cette sensibilité semble liée à la présence à la fois de la mutation IDH1 et de la codélétion 1p/19q, car d’autres lignées cellulaires de gliomes présentant une mutation IDH1 mais dépourvues de cette délétion, comme la lignée NCH1681, se montrent résistantes à la DAC. Ces résultats suggèrent que les thérapies épigénétiques comme le DAC pourraient être particulièrement efficaces dans les oligodendrogliomes anaplasiques porteurs d’une mutation IDH1 et présentant une codélétion 1p/19q.

Des analyses moléculaires plus approfondies révèlent que le traitement par le DAC dans les cellules NCH612 entraîne un enrichissement des voies liées à la réplication de l’ADN, à la régulation du cycle cellulaire et à la fonction lysosomale, ce qui éclaire le mécanisme d’action du médicament. La répression de TERT par le DAC est médiée par p21, ce qui souligne le rôle crucial de cette voie dans la réponse à la thérapie épigénétique. Compte tenu de son profil génétique et épigénétique bien défini, la lignée NCH612 constitue un modèle in vitro précieux pour l’étude de la biologie des oligodendrogliomes anaplasiques et pour le développement de thérapies ciblées destinées aux tumeurs porteuses d’une mutation IDH1 et présentant une codélétion 1p/19q.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.