เซลล์ NCH612

NCH612 เป็นสายเซลล์ oligodendrocytic ที่ได้จากผู้ป่วยซึ่งมีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อสมองมนุษย์ และใช้เป็นแบบจำลองการวิจัยที่เกี่ยวข้องสำหรับ anaplastic oligodendroglioma (WHO grade III) สายเซลล์นี้มีลักษณะการกลายพันธุ์ IDH1 R132H ซึ่งเป็นลักษณะทางพันธุกรรมที่พบได้บ่อยใน oligodendrogliomasการกลายพันธุ์นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงทางอีพิเจเนติก รวมถึงลักษณะทางฟีโนไทป์ของเกาะ CpG ในเนื้องอกสมองชนิดกลิโอมา (glioma CpG island methylator phenotype หรือ G-CIMP) ซึ่งมีส่วนช่วยในการพัฒนาและการลุกลามของเนื้องอก ที่น่าสังเกตคือ NCH612 แสดงการลบบางส่วนของแขนโครโมโซม 1p และ 19q ซึ่งเป็นลักษณะทางพันธุกรรมที่พบได้บ่อยในเนื้องอกสมองชนิดโอลิโกเดนโดรกลีโอมา (oligodendrogliomas) และเกี่ยวข้องกับการพยากรณ์โรคที่ดีขึ้นและการตอบสนองต่อการรักษาบางประเภท

การศึกษาได้แสดงให้เห็นว่า NCH612 มีความไวเป็นพิเศษต่อตัวยับยั้งเอนไซม์เมทิลทรานสเฟอเรสของดีเอ็นเอที่ชื่อว่าเดซิทาบีน (DAC) การรักษาด้วย DAC ส่งผลให้การเพิ่มจำนวนเซลล์และการสร้างโคโลนีลดลง โดยหลักเกิดจากการลดการแสดงออกของ TERT (เอนไซม์เทโลเมอเรส รีเวิร์ส ทรานสคริปเตส) และการเพิ่มการแสดงออกของ p21 ซึ่งเป็นตัวยับยั้งไคเนสที่ขึ้นอยู่กับไซคลินและมีบทบาทในการตอบสนองต่อความเสียหายของดีเอ็นเอที่น่าสนใจคือ ความไวต่อการตอบสนองนี้ดูเหมือนจะเชื่อมโยงกับการมีอยู่ของทั้งการกลายพันธุ์ IDH1 และการลบยีนร่วม 1p/19q เนื่องจากเซลล์เนื้องอกในสมองชนิด IDH1-กลายพันธุ์อื่นๆ ที่ไม่มีการลบยีนนี้ เช่น NCH1681 แสดงความต้านทานต่อ DACผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าการบำบัดด้วยวิธีอีพิเจเนติก เช่น DAC อาจมีประสิทธิภาพเป็นพิเศษในเนื้องอกสมองชนิดอะนาพลาสติกโอลิโกเดนโดรกลีโอมาที่มีการกลายพันธุ์ของยีน IDH1 พร้อมกับการสูญเสียโครโมโซม 1p/19q ร่วมด้วย

การตรวจสอบทางโมเลกุลเพิ่มเติมเผยให้เห็นว่าการรักษาด้วย DAC ในเซลล์ NCH612 นำไปสู่การเพิ่มปริมาณของเส้นทางที่เกี่ยวข้องกับการจำลองดีเอ็นเอ การควบคุมวัฏจักรเซลล์ และการทำงานของไลโซโซม ซึ่งช่วยเปิดเผยกลไกการออกฤทธิ์ของยาการกดขี่ TERT โดย DAC นั้นถูกควบคุมโดย p21 ซึ่งเน้นย้ำถึงบทบาทสำคัญในเส้นทางนี้ต่อการตอบสนองต่อการบำบัดแบบอีพิเจเนติก ด้วยลักษณะทางพันธุกรรมและอีพิเจเนติกที่ชัดเจน NCH612 จึงเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเนื้องอกอะนาพลาสติกโอลิโกเดนโดรกลีโอมา และสำหรับการพัฒนาวิธีการรักษาแบบมุ่งเป้าที่มุ่งเน้นต่อเนื้องอกที่มีกลายพันธุ์ IDH1 พร้อมกับการสูญเสียโครโมโซม 1p/19q

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.