Клетки NCH612

NCH612 е олигодендроцитна клетъчна линия, получена от пациент, която произхожда от човешка мозъчна тъкан и служи като подходящ изследователски модел за анапластичен олигодендроглиом (III степен по СЗО). Тази клетъчна линия носи мутацията IDH1 R132H, характерна генетична промяна, често свързвана с олигодендроглиомите. Мутацията води до епигенетични модификации, включително до фенотип на метилиране на глиомни CpG острови (G-CIMP), който допринася за развитието и прогресията на тумора. Забележително е, че NCH612 показва частична делеция на хромозомни рамена 1p и 19q - генетична характеристика, която често се среща при олигодендроглиомите и се свързва с по-добра прогноза и отговор на определени терапии.

Проучванията показват, че NCH612 е особено чувствителен към инхибитора на ДНК метилтрансферазата децитабин (DAC). Лечението с DAC води до намаляване на клетъчната пролиферация и образуването на колонии, главно чрез понижаване на TERT (теломеразна обратна транскриптаза) и повишаване на регулацията на p21, циклино-зависим киназен инхибитор, участващ в отговора на ДНК увреждането. Интересно е, че тази чувствителност изглежда е свързана с наличието на мутация на IDH1 и коделекция на 1p/19q, тъй като други клетъчни линии на глиом с мутация на IDH1 без тази делеция, като NCH1681, проявяват резистентност към DAC. Тези констатации предполагат, че епигенетичните терапии като DAC могат да бъдат особено ефективни при IDH1-мутантните анапластични олигодендроглиоми с 1p/19q коделеция.

По-нататъшни молекулярни изследвания разкриват, че третирането с DAC в клетките NCH612 води до обогатяване на пътищата, свързани с репликацията на ДНК, регулирането на клетъчния цикъл и лизозомната функция, което хвърля светлина върху механизма на действие на лекарството. Потискането на TERT от DAC се осъществява с посредничеството на p21, което подчертава критичната роля на този път в отговора на епигенетичната терапия. Като се има предвид добре дефинираният генетичен и епигенетичен профил, NCH612 представлява ценен in vitro модел за изучаване на биологията на анапластичните олигодендроглиоми и за разработване на целенасочени терапии, насочени към IDH1-мутантните тумори с 1p/19q коделекция.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация