NCH612-celler

NCH612 er en patientafledt oligodendrocytisk cellelinje, der stammer fra humant hjernevæv og fungerer som en relevant forskningsmodel for anaplastisk oligodendrogliom (WHO grad III). Denne cellelinje har IDH1 R132H-mutationen, en karakteristisk genetisk ændring, der ofte er forbundet med oligodendrogliomer. Mutationen fører til epigenetiske modifikationer, herunder glioma CpG island methylator phenotype (G-CIMP), som bidrager til tumorudvikling og progression. Især udviser NCH612 en delvis deletion af kromosomarmene 1p og 19q, en genetisk egenskab, der ofte findes i oligodendrogliomer og er forbundet med bedre prognose og respons på visse behandlingsformer.

Undersøgelser har vist, at NCH612 er særligt følsom over for DNA-methyltransferasehæmmeren decitabin (DAC). Behandling med DAC resulterer i reduceret celleproliferation og kolonidannelse, primært gennem nedregulering af TERT (telomerase reverse transcriptase) og opregulering af p21, en cyclin-afhængig kinasehæmmer, der er involveret i DNA-skaderesponsen. Interessant nok ser denne følsomhed ud til at være knyttet til tilstedeværelsen af både IDH1-mutationen og 1p/19q-kodeletionen, da andre IDH1-mutante gliomcellelinjer uden denne deletion, såsom NCH1681, udviser resistens over for DAC. Disse resultater tyder på, at epigenetiske terapier som DAC kan være særligt effektive i IDH1-muterede anaplastiske oligodendrogliomer med 1p/19q-kodeletion.

Yderligere molekylære undersøgelser afslører, at DAC-behandling i NCH612-celler fører til berigelse af veje, der er relateret til DNA-replikation, cellecyklusregulering og lysosomal funktion, hvilket kaster lys over lægemidlets virkningsmekanisme. DAC's undertrykkelse af TERT medieres af p21, hvilket understreger denne vejs kritiske rolle i responsen på epigenetisk terapi. På grund af sin veldefinerede genetiske og epigenetiske profil repræsenterer NCH612 en værdifuld in vitro-model til undersøgelse af biologien i anaplastiske oligodendrogliomer og til udvikling af målrettede terapier rettet mod IDH1-mutante tumorer med 1p/19q-kodeletion.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring