Células NCH612

A NCH612 é uma linha celular oligodendrocítica derivada de um doente que tem origem em tecido cerebral humano e serve de modelo de investigação relevante para o oligodendroglioma anaplásico (grau III da OMS). Esta linha de células contém a mutação IDH1 R132H, uma alteração genética caraterística frequentemente associada a oligodendrogliomas. A mutação conduz a modificações epigenéticas, incluindo o fenótipo de metilação de ilhas CpG de glioma (G-CIMP), que contribui para o desenvolvimento e a progressão do tumor. Em particular, o NCH612 apresenta uma deleção parcial dos braços cromossómicos 1p e 19q, uma caraterística genética comummente encontrada nos oligodendrogliomas e associada a um melhor prognóstico e resposta a determinadas terapêuticas.

Estudos demonstraram que o NCH612 é particularmente sensível ao inibidor da DNA metiltransferase decitabina (DAC). O tratamento com DAC resulta numa redução da proliferação celular e da formação de colónias, principalmente através da regulação negativa da TERT (transcriptase reversa da telomerase) e da regulação positiva da p21, um inibidor da quinase dependente da ciclina envolvido na resposta aos danos no ADN. É interessante notar que esta sensibilidade parece estar ligada à presença da mutação IDH1 e da codeleção 1p/19q, uma vez que outras linhas celulares de glioma com mutação IDH1 sem esta deleção, como a NCH1681, apresentam resistência à DAC. Estes resultados sugerem que as terapias epigenéticas, como a DAC, podem ser particularmente eficazes nos oligodendrogliomas anaplásicos com mutação IDH1 e com a codificação 1p/19q.

Outras investigações moleculares revelam que o tratamento com DAC nas células NCH612 leva ao enriquecimento de vias relacionadas com a replicação do ADN, a regulação do ciclo celular e a função lisossómica, lançando luz sobre o mecanismo de ação do fármaco. A repressão de TERT por DAC é mediada por p21, enfatizando o papel crítico desta via na resposta à terapia epigenética. Dado o seu perfil genético e epigenético bem definido, o NCH612 representa um modelo in vitro valioso para o estudo da biologia dos oligodendrogliomas anaplásicos e para o desenvolvimento de terapias direcionadas para os tumores mutantes IDH1 com codeleção 1p/19q.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia