Komórki NCH612

NCH612 to oligodendrocytarna linia komórkowa pochodząca od pacjenta, która wywodzi się z ludzkiej tkanki mózgowej i służy jako odpowiedni model badawczy dla oligodendroglejaka anaplastycznego (stopień III wg WHO). Ta linia komórkowa jest nosicielem mutacji IDH1 R132H, charakterystycznej zmiany genetycznej często związanej z oligodendroglejakami. Mutacja ta prowadzi do modyfikacji epigenetycznych, w tym fenotypu metylatora wysp CpG glejaka (G-CIMP), który przyczynia się do rozwoju i progresji nowotworu. W szczególności, NCH612 wykazuje częściową delecję ramion chromosomowych 1p i 19q, cechę genetyczną powszechnie występującą w oligodendroglejakach i związaną z lepszym rokowaniem i odpowiedzią na niektóre terapie.

Badania wykazały, że NCH612 jest szczególnie wrażliwy na inhibitor metylotransferazy DNA - decytabinę (DAC). Leczenie DAC skutkuje zmniejszoną proliferacją komórek i tworzeniem kolonii, głównie poprzez regulację w dół TERT (odwrotnej transkryptazy telomerazy) i regulację w górę p21, inhibitora kinazy zależnej od cyklin zaangażowanego w odpowiedź na uszkodzenie DNA. Co ciekawe, wrażliwość ta wydaje się być związana z obecnością zarówno mutacji IDH1, jak i kodelecji 1p/19q, ponieważ inne linie komórkowe glejaka z mutacją IDH1 bez tej delecji, takie jak NCH1681, wykazują oporność na DAC. Odkrycia te sugerują, że terapie epigenetyczne, takie jak DAC, mogą być szczególnie skuteczne w oligodendroglejakach anaplastycznych z mutacją IDH1 i kodelecją 1p/19q.

Dalsze badania molekularne ujawniły, że leczenie DAC w komórkach NCH612 prowadzi do wzbogacenia szlaków związanych z replikacją DNA, regulacją cyklu komórkowego i funkcją lizosomalną, rzucając światło na mechanizm działania leku. W represji TERT przez DAC pośredniczy p21, podkreślając krytyczną rolę tego szlaku w odpowiedzi na terapię epigenetyczną. Biorąc pod uwagę dobrze zdefiniowany profil genetyczny i epigenetyczny, NCH612 stanowi cenny model in vitro do badania biologii oligodendroglejaków anaplastycznych i opracowywania terapii celowanych ukierunkowanych na guzy z mutacją IDH1 z kodelecją 1p/19q.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym