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COS-7
Tissu
Rein
Synonymes
Cos-7, COS7, Cos7, CV-1 in Origin Simian-7

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COS-7

Cell line · Référence du produit 605470

COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...

€430.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules COS-7 sont une lignée cellulaire de type fibroblaste dérivée du tissu rénal du singe vert africain. Elles constituent une ressource vitale pour la recherche, notamment en raison de leur grande efficacité de transfection, ce qui en fait un choix populaire pour l'expression de protéines recombinantes. Les cellules COS-7 sont dérivées de la lignée cellulaire CV-1 et transformées avec une forme mutante du virus simien 40 (SV40), qui comprend une origine de réplication permettant la réplication épisomale des plasmides transfectés contenant l'origine de réplication du SV40.

La transfection des cellules COS-7 est facilitée par des réactifs de transfection tels que la Lipofectamine, avec une efficacité qui reflète celle observée dans les cellules HeLa. Les méthodes conventionnelles permettent d'atteindre une efficacité de transfection de 80 % dans les cellules COS-7, ce qui témoigne de la facilité avec laquelle elles peuvent être manipulées génétiquement. La capacité des cellules COS-7 à accueillir de grands plasmides et à les répliquer, conduisant à des rendements élevés des protéines recombinantes souhaitées, en fait une ressource inestimable pour diverses applications, notamment les études d'expression génique, les recherches sur les voies de transduction des signaux et la production de protéines pour les analyses biochimiques.

Les cellules COS-7 présentent une forte sensibilité à divers virus, ce qui en fait un excellent modèle pour les études de virologie, y compris les études d'interaction virus-hôte, l'élucidation du cycle de vie viral et les tests de médicaments antiviraux. Leur permissivité à l'entrée et à la réplication virale est mise à profit pour étudier les mécanismes d'infection virale, la pathogenèse et les réponses cellulaires provoquées par les envahisseurs viraux. Par conséquent, les cellules COS-7 constituent un outil précieux dans le développement de vecteurs viraux pour la thérapie génique et la recherche sur les vaccins.

Les cellules COS-7 sont une pierre angulaire de la recherche en raison de leur grande efficacité de transfection et de leur utilité dans l'expression de protéines recombinantes. Leur facilité de manipulation génétique, combinée à leur sensibilité aux virus, les rend indispensables aux études sur l'expression génétique, la transduction des signaux, la virologie et le développement de vecteurs viraux, consolidant ainsi leur rôle d'outil polyvalent dans les sciences biologiques fondamentales et appliquées.

Tissu
Rein
Applications
Hôte de transfection. Convient à la transfection par des vecteurs nécessitant l'expression de l'antigène T SV40.
Synonymes
  • Cos-7
  • COS7
  • Cos7
  • CV-1 in Origin Simian-7

02Classification

Organisme
Singe vert d'Afrique
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type fibroblastique
Type de cellule
Fibroblaste

04Identifiants

Référence
COS-7 (numéro de catalogue Cytion 605470)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9534
Cellosaurus
CVCL_0224

05Expression et sensibilité

Sensibilité aux virus
SV40 (croissance lytique), SV40 tsA209 à 40 degrés Celsius, mutants SV40 avec délétions dans la région précoce
Produits
Antigène T

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2 donnera une couche confluente en environ 4 jours.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Adulte