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COS-7
Pañuelo de papel
Riñón
Sinónimos
Cos-7, COS7, Cos7, CV-1 in Origin Simian-7

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COS-7

Cell line · Número de producto 605470

COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...

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01Información general

Descripción

Las células COS-7 son una línea celular similar a los fibroblastos derivada del tejido renal del mono verde africano y constituyen un recurso vital en investigación, sobre todo por su alta eficacia de transfección, que las convierte en una opción popular para la expresión de proteínas recombinantes. Las células COS-7 derivan de la línea celular CV-1 y se transforman con una forma mutante del virus simio 40 (SV40), que incluye un origen de replicación que permite la replicación episomal de plásmidos transfectados que contienen el origen de replicación del SV40.

La transfección de células COS-7 se ve facilitada por reactivos de transfección como la Lipofectamina, con una eficacia que refleja la observada en células HeLa. Los métodos convencionales pueden alcanzar una eficiencia de transfección de hasta el 80% en células COS-7, lo que pone de manifiesto su facilidad para la manipulación genética. La capacidad de las células COS-7 para alojar plásmidos de gran tamaño y replicarlos, dando lugar a altos rendimientos de las proteínas recombinantes deseadas, las convierte en un recurso inestimable para diversas aplicaciones, como los estudios de expresión génica, las investigaciones de vías de transducción de señales y la producción de proteínas para análisis bioquímicos.

Las células COS-7 muestran una gran susceptibilidad a diversos virus, lo que las convierte en un modelo excelente para estudios virológicos, como las investigaciones sobre la interacción virus-huésped, la elucidación del ciclo de vida viral y los ensayos con fármacos antivirales. Su permisividad a la entrada y replicación víricas se aprovecha para estudiar los mecanismos de la infección vírica, la patogénesis y las respuestas celulares provocadas por los invasores víricos. Por consiguiente, las células COS-7 constituyen una valiosa herramienta en el desarrollo de vectores virales para la terapia génica y la investigación de vacunas.

Las células COS-7 son una piedra angular en la investigación debido a su alta eficiencia de transfección y a su utilidad en la expresión de proteínas recombinantes. Su facilidad de manipulación genética, combinada con su susceptibilidad a los virus, las hace indispensables para estudios de expresión génica, transducción de señales, virología y desarrollo de vectores virales, consolidando su papel como herramienta versátil tanto en ciencias biológicas básicas como aplicadas.

Pañuelo de papel
Riñón
Aplicaciones
Huésped de transfección. Adecuado para la transfección por vectores que requieren la expresión del antígeno SV40 T.
Sinónimos
  • Cos-7
  • COS7
  • Cos7
  • CV-1 in Origin Simian-7

02Clasificación

Organismo
Mono verde africano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tipo de célula
Fibroblastos

04Identificadores

Referencia
COS-7 (número de catálogo 605470 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9534
Cellosaurus
CVCL_0224

05Expresión y susceptibilidad

Susceptibilidad a los virus
SV40 (crecimiento lítico), SV40 tsA209 a 40 grados Celsius, mutantes SV40 con deleciones en la región inicial
Productos
Antígeno T

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2 producirán una capa confluente en aproximadamente 4 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Adultos