Prejsť na obsah
COS-7
Tkanivo
Obličky
Synonymá
Cos-7, COS7, Cos7, CV-1 in Origin Simian-7

Dokumenty

COS-7

Cell line · Číslo výrobku 605470

COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky COS-7 sú bunkové línie podobné fibroblastom odvodené z tkaniva africkej zelenej opice a sú dôležitým zdrojom vo výskume, najmä pre ich vysokú účinnosť transfekcie, vďaka ktorej sú obľúbenou voľbou na expresiu rekombinantných proteínov. Bunky COS-7 sú odvodené z bunkovej línie CV-1 a transformované mutantnou formou vírusu simian 40 (SV40), ktorá obsahuje replikačný pôvod, ktorý umožňuje epizomálnu replikáciu transfekovaných plazmidov obsahujúcich replikačný pôvod SV40.

Transfekciu buniek COS-7 uľahčujú transfekčné činidlá, ako je Lipofectamine, s účinnosťou, ktorá odráža účinnosť pozorovanú v bunkách HeLa. Konvenčné metódy môžu dosiahnuť až 80 % účinnosť transfekcie v bunkách COS-7, čo poukazuje na ich jednoduchú genetickú manipuláciu. Schopnosť buniek COS-7 prijímať veľké plazmidy a replikovať ich, čo vedie k vysokým výťažkom požadovaných rekombinantných proteínov, z nich robí neoceniteľný zdroj pre rôzne aplikácie vrátane štúdií génovej expresie, skúmania dráhy prenosu signálu a výroby proteínov na biochemické analýzy.

Bunky COS-7 vykazujú silnú citlivosť na rôzne vírusy, čo z nich robí vynikajúci model pre virologické štúdie vrátane skúmania interakcií vírusu s hostiteľom, objasňovania životného cyklu vírusov a testovania antivírusových liekov. Ich tolerantnosť voči vstupu a replikácii vírusov sa využíva na štúdium mechanizmov vírusovej infekcie, patogenézy a bunkových reakcií vyvolaných vírusovými útočníkmi. Bunky COS-7 preto slúžia ako cenný nástroj pri vývoji vírusových vektorov na génovú terapiu a výskum vakcín.

Bunky COS-7 sú základným kameňom výskumu vďaka svojej vysokej účinnosti transfekcie a využiteľnosti pri expresii rekombinantných proteínov. Ich jednoduchá genetická manipulácia v kombinácii s citlivosťou na vírusy ich robí nepostrádateľnými pre štúdie v oblasti expresie génov, prenosu signálov, virológie a vývoja vírusových vektorov, čo upevňuje ich úlohu ako univerzálneho nástroja v základných aj aplikovaných biologických vedách.

Tkanivo
Obličky
Aplikácie
Transfekčný hostiteľ. Vhodný na transfekciu vektormi vyžadujúcimi expresiu antigénu SV40 T.
Synonymá
  • Cos-7
  • COS7
  • Cos7
  • CV-1 in Origin Simian-7

02Klasifikácia

Organizmus
Africká zelená opica
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné
Typ bunky
Fibroblasty

04Identifikátory

Citácia
COS-7 (katalógové číslo Cytion 605470)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9534
Cellosaurus
CVCL_0224

05Prejav a náchylnosť

Náchylnosť na vírusy
SV40 (lytický rast), SV40 tsA209 pri 40 stupňoch Celzia, mutanty SV40 s deléciami v ranej oblasti
Produkty
T antigén

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2 vytvorí konfluentnú vrstvu za približne 4 dni.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Dospelí