Mine otse sisu juurde
COS-7
Kude
Neerud
Sünonüümid
Cos-7, COS7, Cos7, CV-1 in Origin Simian-7

Dokumendid

COS-7

Cell line · Toote number 605470

COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

COS-7 rakud on fibroblastilaadne rakuliin, mis on saadud Aafrika rohelise ahvi neerukoes ja on oluline ressurss teadusuuringutes, eriti nende kõrge transfektsiooni tõhususe tõttu, mis muudab nad populaarseks valikuks rekombinantsete valkude ekspressiooniks. COS-7 rakud on saadud CV-1 rakuliinist ja transformeeritud simian virus 40 (SV40) mutantse vormiga, mis sisaldab replikatsiooni algupära, mis võimaldab SV40 replikatsiooni algupära sisaldavate transfekteeritud plasmiidide episomaalset replikatsiooni.

COS-7 rakkude transfektsiooni hõlbustavad transfektsioonireaktiivid, nagu Lipofectamine, mille tõhusus peegeldab HeLa rakkude puhul täheldatud tõhusust. Tavapäraste meetoditega on võimalik saavutada COS-7 rakkude transfektsiooni tõhusus kuni 80%, mis näitab nende lihtsat geneetilist manipuleeritavust. COS-7 rakkude võime mahutada suuri plasmiide ja paljundada neid, mis viib soovitud rekombinantsete valkude suure saagikuseni, muudab need rakud hindamatuks ressursiks erinevateks rakendusteks, sealhulgas geeniekspressiooni uuringuteks, signaaliülekande radade uurimiseks ja biokeemiliste analüüside jaoks vajalike valkude tootmiseks.

COS-7 rakud on väga tundlikud erinevate viiruste suhtes, mis teeb neist suurepärase mudeli viroloogiauuringuteks, sealhulgas viiruse ja peremehe vastastikmõju uurimiseks, viiruse elutsükli selgitamiseks ja viirusevastaste ravimite testimiseks. Nende vastuvõtlikkust viiruste sisenemisele ja replikatsioonile kasutatakse ära viirusinfektsiooni mehhanismide, patogeneesi ja viiruse sissetungijate poolt esilekutsutud rakuvastuste uurimiseks. Sellest tulenevalt on COS-7 rakud väärtuslikuks vahendiks viirusvektorite väljatöötamisel geeniteraapia ja vaktsiiniuuringute jaoks.

COS-7 rakud on teadusuuringute nurgakiviks tänu nende suurele transfektsioonitõhususele ja kasulikkusele rekombinantsete valkude ekspressioonis. Nende kerge geneetiline manipuleeritavus koos tundlikkusega viiruste suhtes muudab nad asendamatuks geeniekspressiooni, signaaliülekande, viroloogia ja viirusvektorite väljatöötamise uuringutes, tugevdades nende rolli mitmekülgse vahendina nii põhi- kui ka rakenduslike bioloogiliste teaduste valdkonnas.

Kude
Neerud
Rakendused
Transfektsiooni peremees. Sobib transfektsiooniks vektoritega, mis nõuavad SV40 T antigeeni ekspressiooni.
Sünonüümid
  • Cos-7
  • COS7
  • Cos7
  • CV-1 in Origin Simian-7

02Klassifikatsioon

Organism
Aafrika roheline ahv
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide

04Tunnused

Viide
COS-7 (Cytioni katalooginumber 605470)
NCBI maksukood
9534
Cellosaurus
CVCL_0224

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirusele vastuvõtlikkus
SV40 (lüütiline kasv), SV40 tsA209 40 kraadi Celsiuse juures, SV40 mutandid, millel on deletsioonid varajases piirkonnas
Tooted
T antigeen

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 moodustab umbes 4 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud