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COS-7
Tessuto
Rene
Sinonimi
Cos-7, COS7, Cos7, CV-1 in Origin Simian-7

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COS-7

Cell line · Codice prodotto 605470

COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule COS-7 sono una linea cellulare simile a un fibroblasto derivata dal tessuto del rene della scimmia verde africana e sono una risorsa vitale per la ricerca, in particolare per la loro elevata efficienza di trasfezione, che le rende una scelta popolare per l'espressione di proteine ricombinanti. Le cellule COS-7 derivano dalla linea cellulare CV-1 e sono trasformate con una forma mutante del virus 40 della simia (SV40), che include un'origine di replicazione che consente la replicazione episomale dei plasmidi trasfettati contenenti l'origine di replicazione SV40.

La trasfezione delle cellule COS-7 è facilitata da reagenti di trasfezione come la Lipofectamina, con un'efficienza che rispecchia quella osservata nelle cellule HeLa. I metodi convenzionali possono raggiungere un'efficienza di trasfezione fino all'80% nelle cellule COS-7, dimostrando la loro facilità di manipolazione genetica. La capacità delle cellule COS-7 di ospitare plasmidi di grandi dimensioni e di replicarli, portando a rese elevate delle proteine ricombinanti desiderate, le rende una risorsa inestimabile per varie applicazioni, tra cui studi di espressione genica, indagini sulle vie di trasduzione del segnale e produzione di proteine per analisi biochimiche.

Le cellule COS-7 presentano una forte suscettibilità a vari virus, che le rende un modello eccellente per gli studi di virologia, comprese le indagini sull'interazione virus-ospite, l'elucidazione del ciclo di vita virale e la sperimentazione di farmaci antivirali. La loro permissività all'ingresso e alla replicazione virale viene sfruttata per studiare i meccanismi dell'infezione virale, la patogenesi e le risposte cellulari suscitate dagli invasori virali. Di conseguenza, le cellule COS-7 sono uno strumento prezioso per lo sviluppo di vettori virali per la terapia genica e la ricerca sui vaccini.

Le cellule COS-7 sono una pietra miliare della ricerca grazie alla loro elevata efficienza di trasfezione e all'utilità nell'espressione di proteine ricombinanti. La loro facilità di manipolazione genetica, unita alla suscettibilità ai virus, le rende indispensabili per gli studi sull'espressione genica, la trasduzione del segnale, la virologia e lo sviluppo di vettori virali, consolidando il loro ruolo di strumento versatile nelle scienze biologiche di base e applicate.

Tessuto
Rene
Applicazioni
Ospite di trasfezione. Adatto per la trasfezione da parte di vettori che richiedono l'espressione dell'antigene T SV40.
Sinonimi
  • Cos-7
  • COS7
  • Cos7
  • CV-1 in Origin Simian-7

02Classificazione

Organismo
Scimmia verde africana
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto
Tipo di cellula
Fibroblasti

04Identificatori

Riferimento bibliografico
COS-7 (numero di catalogo Cytion 605470)
Codice fiscale NCBI
9534
Cellosaurus
CVCL_0224

05Espressione e suscettibilità

Suscettibilità ai virus
SV40 (crescita litica), SV40 tsA209 a 40 gradi Celsius, mutanti SV40 con delezioni nella regione iniziale
Prodotti
Antigene T

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 produrrà uno strato confluente in circa 4 giorni
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
Adulti