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COS-7
Cell line · Product number 605470
COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...
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01General information
- Description
COS-7 细胞是一种从非洲绿猴肾组织中提取的成纤维细胞样细胞系，是研究领域的重要资源，尤其是其高转染效率使其成为表达重组蛋白的热门选择。COS-7 细胞来源于 CV-1 细胞系，并用猿猴病毒 40（SV40）的突变形式进行了转化，其中包括一个复制原点，允许含有 SV40 复制原点的转染质粒进行外显子复制。
转染试剂（如 Lipofectamine）可促进 COS-7 细胞的转染，其效率与在 HeLa 细胞中观察到的效率相同。传统方法在 COS-7 细胞中的转染效率可高达 80%，这表明它们易于进行基因操作。COS-7 细胞能够容纳大型质粒并对其进行复制，从而获得高产率的所需重组蛋白，这使其成为各种应用（包括基因表达研究、信号转导通路研究以及生产用于生化分析的蛋白质）的宝贵资源。
COS-7 细胞对各种病毒有很强的敏感性，因此是病毒学研究（包括病毒-宿主相互作用研究、病毒生命周期阐明和抗病毒药物测试）的绝佳模型。利用它们对病毒进入和复制的容许性来研究病毒感染机制、致病机理以及病毒入侵者引起的细胞反应。因此，COS-7 细胞是开发用于基因治疗和疫苗研究的病毒载体的重要工具。
COS-7 细胞转染效率高，可用于重组蛋白的表达，因此是研究的基石。COS-7 细胞易于遗传操作，对病毒易感，因此是研究基因表达、信号转导、病毒学和病毒载体开发不可或缺的工具，巩固了其在基础和应用生物科学领域的多功能工具地位。
- Tissue
- 肾脏
- Applications
- 转染宿主。适用于需要表达 SV40 T 抗原的载体转染。
- Synonyms
- Cos-7
- COS7
- Cos7
- CV-1 in Origin Simian-7
02Classification
- Organism
- African green monkey
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 纤维母细胞样
- Cell type
- 成纤维细胞
04Identifiers
- Citation
- COS-7（Cytion 目录编号 605470）
- NCBI TaxID
- 9534
- Cellosaurus
- CVCL_0224
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- SV40（溶解生长）、40 摄氏度下的 SV40 tsA209、早期区域缺失的 SV40 突变体
- Products
- T 抗原
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12（1:1），w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820400a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合细胞层
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解冻后，将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 成人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Disclaimer
- 我们提供的细胞仅用于体外实验室研究目的，不用于临床或诊断用途，也不得用于人类或兽医目的。用户必须遵守在研究环境中处理和使用这些细胞的所有适用准则和法规。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes