Gå direkte til indholdet
COS-7
Væv
Nyre
Synonymer
Cos-7, COS7, Cos7, CV-1 in Origin Simian-7

Dokumenter

COS-7

Cell line · Varenummer 605470

COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

COS-7-celler er en fibroblastlignende cellelinje, der stammer fra nyrevæv fra en afrikansk grøn abe, og de er en vigtig ressource i forskningen, især på grund af deres høje transfektionseffektivitet, hvilket gør dem til et populært valg til ekspression af rekombinante proteiner. COS-7-celler stammer fra CV-1-cellelinjen og er transformeret med en mutantform af simian virus 40 (SV40), som indeholder en replikationsoprindelse, der giver mulighed for episomal replikation af transfekterede plasmider, der indeholder SV40-replikationsoprindelsen.

Transfektion af COS-7-celler lettes af transfektionsreagenser som Lipofectamine med en effektivitet, der afspejler den, der er observeret i HeLa-celler. Konventionelle metoder kan opnå op til 80 % transfektionseffektivitet i COS-7-celler, hvilket viser, at de er lette at manipulere genetisk. COS-7-cellernes evne til at rumme store plasmider og replikere dem, hvilket fører til høje udbytter af de ønskede rekombinante proteiner, gør dem til en uvurderlig ressource til forskellige anvendelser, herunder genekspressionsundersøgelser, undersøgelser af signaltransduktionsveje og produktion af proteiner til biokemiske analyser.

COS-7-celler udviser en stærk modtagelighed over for forskellige vira, hvilket gør dem til en fremragende model for virologiske undersøgelser, herunder undersøgelser af virus-værtsinteraktion, belysning af viral livscyklus og test af antivirale lægemidler. Deres tolerance over for viral indtrængen og replikation udnyttes til at studere mekanismerne for virusinfektion, patogenese og de cellulære reaktioner, der fremkaldes af virale angribere. Derfor er COS-7-celler et værdifuldt værktøj i udviklingen af virale vektorer til genterapi og vaccineforskning.

COS-7-celler er en hjørnesten i forskningen på grund af deres høje transfektionseffektivitet og anvendelighed i rekombinant proteinudtryk. Deres lette genetiske manipulation kombineret med deres modtagelighed over for vira gør dem uundværlige til undersøgelser af genekspression, signaltransduktion, virologi og udvikling af virale vektorer, hvilket styrker deres rolle som et alsidigt værktøj inden for både grundlæggende og anvendt biologisk videnskab.

Væv
Nyre
Anvendelser
Vært for transfektion. Velegnet til transfektion med vektorer, der kræver ekspression af SV40 T-antigen.
Synonymer
  • Cos-7
  • COS7
  • Cos7
  • CV-1 in Origin Simian-7

02Klassificering

Organisme
Afrikansk grøn abe
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast-lignende
Celletype
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
COS-7 (Cytion katalognummer 605470)
NCBI-skattenummer
9534
Cellosaurus
CVCL_0224

05Udtryk og modtagelighed

Virusfølsomhed
SV40 (lytisk vækst), SV40 tsA209 ved 40 grader Celsius, SV40-mutanter med deletioner i den tidlige region
Produkter
T-antigen

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil danne et sammenhængende lag på ca. 4 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Voksen