Preskoči na vsebino
COS-7
Tkivo
Ledvice
Sinonimi
Cos-7, COS7, Cos7, CV-1 in Origin Simian-7

Dokumenti

COS-7

Cell line · Številka izdelka 605470

COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice COS-7 so fibroblastom podobne celične linije, pridobljene iz tkiva ledvic afriške zelene opice, in so pomemben vir v raziskavah, zlasti zaradi visoke učinkovitosti transfekcije, zaradi česar so priljubljena izbira za izražanje rekombinantnih beljakovin. Celice COS-7 so pridobljene iz celične linije CV-1 in transformirane z mutantno obliko virusa simijanskega virusa 40 (SV40), ki vključuje replikacijski izvor, ki omogoča epizomalno replikacijo transfundiranih plazmidov, ki vsebujejo replikacijski izvor SV40.

Transfekcijo celic COS-7 olajšajo reagenti za transfekcijo, kot je Lipofectamine, z učinkovitostjo, ki odraža učinkovitost, opaženo pri celicah HeLa. S konvencionalnimi metodami lahko dosežemo do 80-odstotno učinkovitost transfekcije v celicah COS-7, kar kaže na njihovo enostavnost za gensko manipulacijo. Zaradi sposobnosti celic COS-7, da sprejmejo velike plazmide in jih razmnožujejo, kar omogoča visoke donose želenih rekombinantnih beljakovin, so neprecenljiv vir za različne aplikacije, vključno s študijami izražanja genov, raziskavami poti prenosa signalov in proizvodnjo beljakovin za biokemične analize.

Celice COS-7 so zelo občutljive na različne viruse, zato so odličen model za virološke študije, vključno s preiskavami interakcij med virusom in gostiteljem, pojasnitvijo življenjskega cikla virusa in testiranjem protivirusnih zdravil. Njihova dovzetnost za vstop in razmnoževanje virusov se uporablja za preučevanje mehanizmov virusnih okužb, patogeneze in celičnih odzivov, ki jih sprožijo virusni napadalci. Zato so celice COS-7 dragoceno orodje pri razvoju virusnih vektorjev za gensko terapijo in raziskave cepiv.

Celice COS-7 so temelj raziskav zaradi visoke učinkovitosti transfekcije in uporabnosti pri izražanju rekombinantnih beljakovin. Zaradi enostavne genetske manipulacije in dovzetnosti za viruse so nepogrešljive pri študijah izražanja genov, prenosa signalov, virologije in razvoja virusnih vektorjev, kar utrjuje njihovo vlogo vsestranskega orodja v temeljnih in uporabnih bioloških znanostih.

Tkivo
Ledvice
Uporaba
Gostitelj za transfekcijo. Primeren za transfekcijo z vektorji, ki zahtevajo izražanje antigena SV40 T.
Sinonimi
  • Cos-7
  • COS7
  • Cos7
  • CV-1 in Origin Simian-7

02Razvrstitev

Organizem
Afriška zelena opica
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni
Vrsta celice
Fibroblast

04Identifikatorji

Navajanje vira
COS-7 (kataloška številka Cytion 605470)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9534
Cellosaurus
CVCL_0224

05Izražanje in dovzetnost

Občutljivost na virus
SV40 (litična rast), SV40 tsA209 pri 40 stopinjah Celzija, mutanti SV40 z delecijami v zgodnji regiji
Izdelki
Antigen T

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh oblikovalo konfluentno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Odrasli